【摘 要】
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目的（1）通过夏枯草有效组分最佳给药剂量的药效实验、不同夏枯草提取物镇静催眠的药效实验明确夏枯草有效组分的最佳给药剂量,以及不同夏枯草提取物之间的药效区别。（2）通过给大鼠腹腔注射PCPA混悬液,制备PCPA睡眠剥夺模型,用戊巴比妥钠睡眠实验观察其睡眠潜伏期和睡眠时长,验证夏枯草有效组分抗失眠的药效;用HE染色验证夏枯草有效组分对不同脑区神经细胞形态的影响。（3）通过戊巴比妥钠睡眠实验探究夏枯草主
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目的（1）通过夏枯草有效组分最佳给药剂量的药效实验、不同夏枯草提取物镇静催眠的药效实验明确夏枯草有效组分的最佳给药剂量,以及不同夏枯草提取物之间的药效区别。（2）通过给大鼠腹腔注射PCPA混悬液,制备PCPA睡眠剥夺模型,用戊巴比妥钠睡眠实验观察其睡眠潜伏期和睡眠时长,验证夏枯草有效组分抗失眠的药效;用HE染色验证夏枯草有效组分对不同脑区神经细胞形态的影响。（3）通过戊巴比妥钠睡眠实验探究夏枯草主要原型成分迷迭香酸、异迷迭香酸苷是否为夏枯草有效组分中发挥镇静催眠作用的主要成分;通过迷迭香酸、异迷迭香酸苷与咖啡酸混合用药,探究咖啡酸对夏枯草有效组分镇静催眠作用的影响;通过分子对接探究迷迭香酸、异迷迭香酸苷、咖啡酸对镇静催眠作用影响的具体靶点。方法（1）实验一中,先对阈上、阈下剂量戊巴比妥钠浓度进行确定,将小鼠分为戊巴比妥钠35 mg/kg组、40 mg/kg组、45 mg/kg组、50 mg/kg组,分别腹腔注射相应浓度的戊巴比妥钠溶液。注射完成后,观察各组小鼠入睡只数,计算入睡率以确定戊巴比妥钠阈上、阈下剂量;在夏枯草有效组分最佳给药剂量的药效实验、不同夏枯草提取物镇静催眠作用的药效实验中,小鼠被随机分为空白组、阳性组及其他相应的给药组,灌胃给药30分钟后,腹腔注射阈下剂量戊巴比妥钠,记录入睡只数;腹腔注射阈上剂量戊巴比妥钠,观察睡眠潜伏期及睡眠时长。（2）实验二中,腹腔注射PCPA制备大鼠睡眠剥夺模型,制备成功后将大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、夏枯草有效组分组。灌胃给与相应药物,持续7天。7天后,通过一般情况、睡眠潜伏期和睡眠时长的观察,评价夏枯草有效组分抗失眠的药效。用HE染色的方法,观察不同脑区的神经细胞形态变化。（3）实验三中,在夏枯草有效组分主要原型成分的药效实验和咖啡酸对夏枯草有效组分中主要原型成分的药效影响实验中,小鼠被随机分为空白组、阳性组及其他相应的给药组,灌胃给药30分钟后,腹腔注射阈下剂量戊巴比妥钠溶液,记录入睡的只数,计算入睡率;腹腔注射阈上剂量戊巴比妥钠溶液,观察睡眠潜伏期及睡眠时长。并运用分子对接,将迷迭香酸、异迷迭香酸苷和咖啡酸的小分子配体和失眠相关蛋白受体分别对接,计算结合力得分。结果（1）实验一中:夏枯草有效组分最佳给药剂量的药效实验中,随着给药剂量的增加,夏枯草有效组分镇静催眠作用呈现出先增高后降低的趋势,且中剂量（71.76 mg/kg）为最佳给药剂量,可延长小鼠睡眠潜伏期（P＜0.05）,增加睡眠时长（P＜0.01）,提高小鼠入睡率;不同夏枯草提取物镇静催眠的药效实验中,夏枯草有效组分的药效优于夏枯草乙醇提取物,可延长睡眠潜伏期（P＜0.05）,缩短睡眠时长（P＜0.05）。（2）实验二中:夏枯草有效组分对失眠大鼠的药效实验研究中,夏枯草有效组分能显著性缩短PCPA失眠大鼠的睡眠潜伏期（P＜0.01）,显著性的增加睡眠时长（P＜0.01）,抗失眠效果明显,并且能够改善下丘脑、皮层、海马区神经细胞形态,其中下丘脑神经细胞形态变化最明显。（3）实验三中:夏枯草有效组分中主要原型成分的药效实验中,迷迭香酸、异迷迭香酸苷都可改善小鼠睡眠:迷迭香酸可非常显著的缩短睡眠潜伏期（P＜0.01）,延长睡眠时长（P＜0.01）;异迷迭香酸苷可非常显著的缩短睡眠潜伏期（P＜0.01）,显著延长睡眠时长（P＜0.05）。在咖啡酸对夏枯草有效组分中主要原型成分药效影响的实验中,发现咖啡酸可抑制夏枯草有效组分中主要原型成分迷迭香酸、异迷迭香酸苷的镇静催眠作用,可能发挥拮抗剂的作用。咖啡酸、迷迭香酸、异迷迭香酸苷对夏枯草有效组分镇静催眠作用影响的靶点探究中,迷迭香酸和异迷迭香酸苷与失眠相关受体的平均结合自由能大于咖啡酸,因此推测二者可通过与失眠相关受体结合发挥镇静催眠作用;咖啡酸与失眠相关受体的平均结合自由能略低于迷迭香酸、异迷迭香酸苷,推测其可能发挥竞争性拮抗作用影响睡眠。结论夏枯草有效组分具有镇静催眠作用,其药效随给药剂量的增加呈现先增高后降低的趋势,中剂量（71.76 mg/kg）为最佳给药剂量。夏枯草有效组分还可改善PCPA失眠大鼠睡眠,改善下丘脑、皮层、海马神经细胞形态,发挥抗失眠作用。咖啡酸的存在可能影响夏枯草有效组分镇静催眠作用,并随着给药剂量的增加,可能通过与迷迭香酸、异迷迭香酸苷争夺失眠相关受体的结合位点影响药效趋势,使其呈现先增高后降低的趋势。
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