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本研究以红地球葡萄(Vitis vinifera L.‘Redglobe’)的带芽茎段为外植体进行了组织培养、秋水仙素诱变及RAPD鉴定研究。首先研究了红地球葡萄的初代培养,继代增殖、生根培养的最佳培养基配方,然后用设定了浓度梯度的秋水仙素(Colchicine)对其诱变,并采用RAPD技术鉴定诱变株系,判断诱变是否有效,最后对试管苗移栽介质进行了选择,结果表明: 1) 初代培养 ①B5培养基为红地球葡萄带芽茎段组织培养的最适基本培养基。 ②红地球葡萄的最佳初代培养基配方为:B5+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L和B5+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L。 ③在6-BA、ZT、KT这三种细胞分裂素中促进红地球侧芽萌发的最佳细胞分裂素是6-BA,ZT次之,KT最差。 2) 继代增殖 ①适宜红地球增殖的最佳培养基配方为:B5+6-BA0.05mg/L+IBA0.2mg/L,增殖系数为4.83。 ②水蜜桃汁和葡萄汁这两种天然提取物的加入并不能提高红地球葡萄的增殖效果。 ③蔗糖和葡萄糖两种碳源中,葡萄糖是最适合红地球葡萄增殖培养的碳源。葡萄糖的最适浓度是40g/L。 3) 壮苗与生根培养的最佳培养基配方是B5+IBA0.1mg/L+AC0.2%。 4) RAPD检测试验 ①本研究采用改良CTAB法,只从试管苗1~3片嫩叶中提取DNA,与其他部位提取效果相比量大,纯度高、褐化程度低:得到的DNA产率达到50~150ng/mg,OD260/OD280为1.75~1.85。虽然不如大田苗的DNA产率,但能达到RAPD试验的要求。 ②从30个随机引物中选出了10个多态性好的随机引物,用这10个引物对诱变植株进行了扩增,10个引物共扩增出了2102条DNA带,平均每个引物21条,其中92条具有特异性带,占总条带数的4.42%。