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1.研究背景与目的：
神经母细胞瘤(Neuroblastoma，NB)是小儿时期最常见的颅外实体瘤，约占小儿肿瘤的8-10％。NB是一种高度异质性的恶性肿瘤。一些神经母细胞瘤可以自发消退或者分化成良性的神经节细胞瘤，单纯手术治疗可治愈I期及II期病例，婴儿期的病例即使已处于广泛期仍然具有较好的预后。但大于一岁的晚期的病例，虽采用强烈化疗、手术、放疗、造血干细胞移植及生物治疗等综合治疗手段，预后仍差，5年生存率不足40％。因此如何进一步提高晚期病人疗效及探索新的预后指标成为研究热点。
文献报道的NB的分子预后指标很多，但除公认的MYCN基因扩增与不良预后明确相关外，其他指标的意义仍然存在分歧，其临床应用价值仍未得到普遍认可。国际儿童肿瘤协作组，基础各项研究中发现的临床预后指标，制定了神经母细胞瘤临床危险度分层系统，并推广应用于临床(详见前言)。因需要进行基因检测，此危险度分层系统在国内应用尚较困难。如何找到简便易行且能更好预测NB生存的指标成为临床研究的热点。
Raf激酶抑制蛋白(RafKinaseinhibitorprotein,RKIP)是磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族成员。RKIP在多种实体肿瘤，如前列腺癌、肠癌、乳腺癌、恶性黑色素瘤中能抑制肿瘤细胞的转移和植入，其表达水平与肿瘤转移潜能呈负相关，高表达者预后较好。神经母细胞瘤尚无相关的研究报道。基于其在其它肿瘤中的研究发现，我们推测RKIP可能在神经母细胞瘤中的发生发展，转移，耐药及复发中可能起重要作用。
本研究通过免疫组化法检测RKIP在NB的表达情况，分析其与患者的临床特征、近期疗效、远期生存及预后因素的关系，旨在探讨该指标对NB的预后预测价值，从而为进一步临床治疗决策的制订和预后判断提供新的依据。
2.研究方法：
1996年1月-2007年12月在中山大学肿瘤防治中心就诊并有组织腊块的神经母细胞瘤患者共48例，全组患者中位年龄4岁(0.1-23岁)，<1岁患者3例(6.3％)，男性32例(66.7％)，女性16例(33.3％)。按INSS分期II期者2例(4.2％)，III期者17例(35.3％)，IV期患者27例(56.3％)，IVs期患者2例(4.2％)；原发于腹部者34例(70.8％)，原发纵隔者9例(16.6％)，其他部位5例(12.6％)；骨髓侵犯者21例(43.8％)，骨转移者9例(18.8％)；进行化疗且有疗效评价者39例(81.3％)，未行化疗或者无法评价者9例(18.7％)。
采用免疫组织化学方法(三步法)检测患者肿瘤组织RKIP的表达情况。以Fromowitz法评估RKIP的表达强度，并分为低表达和高表达两组，分析其与患者的临床特征，如年龄，INSS分期、肿瘤原发部位、是否有骨髓侵犯、是否有骨转移等的关系，以及RKIP不同表达水平对近期疗效和远期生存的影响。
用SPSS13.0统计软件包进行数据统计。
3.结果：
RKIP在NB中的阳性表达主要位于细胞浆及质膜。全组48例患者阳性率为89.6％(43/48)，其中弱阳性(+)23例(47.6％)，阳性(++)18例(37.5％)，强阳性(+++)2例(4.2％)。低表达(-~+)28例(58.3％)，高表达(++~+++)20例(41.7％)。
RKIP表达与患者年龄、分期、肿瘤原发部位、有无骨转移及骨髓转移等临床特征无关。结果显示化疗有效组RKIP高表达者占38.2％(13/34例)，化疗无效组RKIP高表达者占60％(3/5例)，两组差别无统计学意义(P>0.05)。
48例患者中位生存期(MS)25个月(95％置信区间12.2-38.4个月)，总的1、2、3年生存率(OS)分别为79.5％、47.3％和30.1％。RKIP低表达组和高表达组的无进展生存，2年PFS分别为17.6％、43.8％；两组间的总生存差异无显著的统计学意义(P=0.109)。RKIP低表达组和高表达组两者的3年OS分别为16.4％和43.5％；两组间的总生存差异无显著的统计学意义(P=0.080)。单因素生存分析，性别、年龄、INSS分期、原发部位、有无骨转移、有无骨髓转移及RKlP的表达水平与神经母细胞瘤总生存分析显示，只有INSS分期具有统计学意义；以上因素再进一步作Cox回归分析，结果显示分期、KRIP表达水平是神经母细胞瘤的预后指标(P<0.05)。
年龄>1岁晚期(III～IV期)且接受基本规范治疗的高危病人39例，我们将这部分病人再次进行统计分析。RKIP低表达组和高表达组两者的3年OS分别为9.3％和46.2％；两组间的生存差异具有显著的统计学意义(P=0.016)。单因素生存分析性别、INSS分期、原发部位、有无骨转移、有无骨髓转移、综合治疗后获得的状态及RKIP的表达水平与神经母细胞瘤生存分析显示，INSS分期、综合治疗后获得的状态及RKIP的表达水平是神经母细胞瘤的预后指标；Cox回归分析，结果显示治疗后获得的状态是神经母细胞瘤独立的预后因子(P<0.05)。
4.结论：
1)RKIP在神经母细胞瘤表达上调，具有较高的阳性率(89.6％)。
2)RKIP表达与患者年龄、原发部位、有无骨转移、有无骨髓转移，化疗疗效、分期等无明显相关性。
3)RKIP表达与神经母细胞瘤特别是高危神经母细胞瘤患者生存有一定相关性。
4)RKIP的表达水平可能是神经母细胞瘤的预后指标，检测RKIP的表达水平可能有助于临床判断神经母细胞瘤的远期生存。
5)综合治疗后状得的状态是神经母细胞瘤独立的预后因子。
6)RKIP在神经母细胞瘤中的预后价值仍有待更大规模的临床研究进一步加以验证。