基于等效替换法的巴西人参四气研究

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目的:基于复方配伍替换法将党参方中党参替换为巴西人参,采用生化效应指标对巴西人参方和党参方进行寒热属性判别,代谢组学方法对两组方进行温凉属性判别,进一步探究巴西人参的四性归属;分析巴西人参方药性的分子机制,探讨其药性归属的科学性;以期赋予外来药材四气的归属,助力外来药材的中药化。方法:1采用生化效应指标研究巴西人参方和党参方的寒热归属,再判断巴西人参的寒热属性。大鼠随机分为巴西人参方组、党参方组,共给药29天,检测大鼠自主活动次数,能量相关指标包括多种酶活性(Na+-K+-ATP,SDH)、以及肾上腺、睾丸和体脂的系数、血常规和ALT、AST、血清中T3、T4等含量。导入中药寒热属性判别决策树模型,预测出两个方子的寒热属性,进而推测巴西人参的四气属性。2为提升判别的精确性,采用代谢组学方法研究巴西人参方和党参方的温凉归属,再判断巴西人参的温凉属性。大鼠随机分为空白对照组,温性药类6组(黄芪、桂枝、小茴香、乌药、当归、苍术),凉性药类6组(小蓟、钩藤、女贞子、葛根、大蓟、薄荷),巴西人参方组,党参方组。于给药第29天分别收集各组动物的尿液,基于UPLC-QTOF-MS采集数据后,联合SIMCA软件对各组数据进行主成分分析(PCA),基于偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)方法建立温凉药性的判别模型,将两组方数据导入所建温凉判别模型中,判断两个方子的温凉属性,进而推测巴西人参的四气属性。3基于UPLC-QTOF-MS分析各组大鼠代谢组分信息,探究巴西人参方的药性归属机制。采用SIMCA软件计算温凉药VIP>1的潜在生物标记物,采用人体代谢组数据库(HMDB)、Progenesis QI软件对潜在生物标志物(Marker)鉴定,Metabo Analyst数据库对24个Marker进行通路分析,探讨巴西人参方的药性归属机制。结果:1寒热属性判别模型结果显示C5.0算法预测有95.70%的准确率,表示巴西人参方(n=9)是热属性的概率为66.7%,党参方(n=9)是热属性的概率为88.9%,C&R算法显示结果一致,同时预测巴西人参是平性的概率为59.3%。2在正离子模式下采集的代谢组学数据,以黄芪、桂枝、小茴香、乌药、当归等五组温药,及小蓟、钩藤、女贞子、葛根、大蓟五组凉药作训练集,薄荷、苍术组为测试集建立模型,模型的训练能力和测试能力最好[R2X(Cum)=0.388,R2Y(Cum)=0.488,Q2(Cum)=0.373],综合准确率为94.4%,巴西人参方的预测结果属于温性的概率为100%,党参方结果属于温性的概率为77.8%,同时预测巴西人参属于平性的概率为77.8%,对比党参的药性偏温。3在正离子模式条件下,温凉药对大鼠体内缬氨酸、色氨酸-谷氨酰胺等24个Marker的调节趋势基本一致,巴西人参方调节趋势更偏温性。将24个Marker的HMDB ID号导入Metabo Analyst数据库进行通路分析,表明巴西人参方主要参与调节细胞色素P450对异生素的代谢通路。结论:在生化效应指标判别结果中显示巴西人参方属热性的概率为66.7%,党参方属热性的概率为88.9%,预测巴西人参属平性的概率为59.3%;后基于代谢组学建立的温凉判别模型,表明巴西人参方和党参方均属温性,因党参为平性药,结合巴西人参方的温性概率大于党参方的温性,推测巴西人参为平性偏温;温凉药对酪氨酸、缬氨酸、色氨酸-谷氨酰胺等24个生物标记物的调节趋势基本一致,巴西人参方偏向温药的调控方向,且主要参与调节细胞色素P450对异生素的代谢通路。
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