NSAIDs干预RAW264.7细胞炎症模型甘油磷脂代谢的UPLC-Q/TOF MS分析

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RAW264.7细胞是小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,其甘油磷脂类成分在炎症反应、免疫反应和吞噬反应中发挥着关键的作用。本研究运用脂组学方法,探讨与炎症发生、消退过程相关的甘油磷脂类生物标记物。1. RAW264.7细胞甘油磷脂类成分的UPLC-Q/TOF MS分析本研究建立Kdo2-Lipid A诱导下的RAW264.7细胞炎症模型,运用UPLC-Q/TOF MS分析RAW264.7细胞中的甘油磷脂类代谢物,采用ESI+和ESI-两种离子模式,建立了全面、快速分离RAW264.7细胞中甘油磷脂类成分的分析方法,通过一级质谱的精确分子量信息、二级质谱的裂解碎片信息以及与标准品、参考文献相比对的方法,鉴别了RAW264.7细胞中的78个甘油磷脂类成分,有22个磷脂酰乙醇胺、49个磷脂酰胆碱、4个磷脂酰甘油、1个磷脂酰肌醇和2个未知的甘油磷脂类成分,可能有5个甘油磷脂成分是RAW264.7细胞中首次发现。2. NSAIDs干预不同状态RAW264.7细胞的UPLC/Q-TOF MS分析建立Kdo2-Lipid A诱导的RAW264.7细胞炎症模型,用阿司匹林、布洛芬和吲哚美辛进行药物干预,结合UPLC/Q-TOF MS技术对空白组、炎症模型组、阿司匹林给药组、布洛芬给药组和吲哚美辛给药组进行分析,建立不同状态下的RAW264.7细胞甘油磷脂代谢总离子流谱图。3.化学计量学分析采用PCA和PLS-DA对五组样品建立数据模型及进行关系表征;利用PCLDA和PLSDA方法对数据进行空白组和炎症模型组、炎症模型组和各给药组之间分型。结果表明非甾体抗炎药的抗炎作用与甘油磷脂类代谢相关。通过t检验、Shrinkt、PCLDA、VIP和PLSDA方法得到64个潜在的甘油磷脂标记物,结合脂质组学数据库、脂质代谢网络以及生物信息学,得到PC(16:0/18:1)和PE(18:0/18:1)的代谢调节贯穿于炎症的发生和消退过程,可能是炎症发生、消退过程中的重要的脂质标记物,其它潜在生物标记物的作用机制有待进一步研究。
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