【摘 要】
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目的:动脉粥样硬化性心血管疾病（Atherosclerotic cardiovascular disease,ACVDs）是人类主要死亡原因之一,ACVDs是一种涉及免疫和炎症反应的复杂慢性炎性疾病,除了与心血管系统自身的危险因素相关外,牙菌斑中细菌侵犯牙周组织导致的牙周炎（Periodontitis,PD）与动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）的发生发展密切相关。研究表明micr
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目的:动脉粥样硬化性心血管疾病（Atherosclerotic cardiovascular disease,ACVDs）是人类主要死亡原因之一,ACVDs是一种涉及免疫和炎症反应的复杂慢性炎性疾病,除了与心血管系统自身的危险因素相关外,牙菌斑中细菌侵犯牙周组织导致的牙周炎（Periodontitis,PD）与动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）的发生发展密切相关。研究表明micro RNAs（miRNA）作为基因表达的关键调节剂,与PD和AS的发生发展也具有相关性,但其潜在机制尚不清楚。本研究通过建立PD伴AS细胞模型,研究miR-146a-5p通过TLR4-NF-κB通路对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）功能障碍的影响。方法:用50μg/m L氧化低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein,ox-LDL）刺激HUVECs 12h或者用50μg/m Lox-LDL刺激HUVECs 12h,再用（1、5、10μg/m L）牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Porphyromonas gingivalis Lipopolysaccharides,P.g-LPS）刺激24h以及转染miR-146a-5p过表达慢病毒或阴性对照物72h后再行50μg/m L ox-LDL刺激12h及不同浓度的P.g-LPS刺激24h,采用实时定量PCR、酶联免疫吸附测定（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）、蛋白印迹法（Western blot,WB）分别检测Toll样受体4（Toll-like receptors 4,TLR-4）、核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）基因的表达水平,细胞上清液中白介素-6（Interleukin-6,IL-6）的表达水平,血管细胞粘附分子（Vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1）蛋白的表达水平。结果:ox-LDL联合P.g-LPS刺激HUVECs后,与Control组相比,TLR-4、NF-κB、IL-6、VCAM-1的表达显著增加,miR-146a-5p表达减少。转染miR-146a-5p过表达慢病毒或阴性对照物后,与未转染组相比miR-146a-5p表达增加,TLR-4、NF-κB、IL-6、VCAM-1表达均减少。结论:miRNA-146a-5p作为一种炎症保护因子,通过TLR4-NF-κB通路可改善经ox-LDL联合P.g-LPS刺激后,HUVECs的炎症状态。miRNA-146a-5p可能成为PD伴AS疾病潜在的治疗靶点。
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