目的：小胶质细胞是中枢神经系统常驻免疫细胞，其介导的神经炎症反应在抑郁症等多种重大神经系统疾病发生发展过程中发挥重要的作用。环状RNA（circular RNA，circRNA）因其在中枢神经系统高富集的特性，已被证实与多种中枢神经系统疾病密切相关。课题组前期研究表明，在海马脑区过表达环状RNA DYM （circular RNA DYM，circDYM）显著改善了脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的小鼠抑郁样行为，并且在此过程中伴随着对小胶质细胞活化诱导的神经炎性反应的抑制作用。过度活化的小胶质细胞会引起细胞凋亡，加重抑郁症的发展进程。然而，circDYM对小胶质细胞凋亡的作用及其机制目前仍然未知。因此，本课题将探究circDYM对神经炎症病理进程中小胶质细胞凋亡的调控作用及其机制，为神经炎症相关疾病的诊疗提供新的理论支持。
　　方法：（1）应用糖水偏好、强迫游泳和悬尾等行为学方法检测海马脑区过表达circDYM对LPS诱导的小鼠抑郁样行为的影响；（2）利用western blot法检测在海马脑区和BV2细胞过表达circDYM对LPS诱导的小胶质细胞自噬和凋亡的影响；（3）应用生物信息学手段预测与 circDYM 结合的蛋白，并基于预测结果，分析circDYM与CCAAT增强子结合蛋白（CCAAT enhancer binding protein beta， CEBPB ）的结合位点，利用 RNA 蛋白免疫沉淀技术（ RNA Binding Protein Immunoprecipitation，RIP）联合原位杂交确认两者的结合；（4）利用western blot法检测在BV2细胞过表达CEBPB对LPS诱导的小胶质细胞自噬和凋亡的影响；（5）通过核质分离技术探究circDYM对CEBPB亚细胞分布的影响；（6）采用生物信息学手段预测CEBPB下游靶蛋白，通过过表达或干扰CEBPB表达，探究其对ZC3H4表达水平的影响；（7）利用western blot法检测在海马脑区和BV2细胞ZC3H4表达水平；（8）通过共转染circDYM过表达慢病毒及CEBPB过表达质粒，观察circDYM/CEBPB轴对ZC3H4表达水平的影响；（9）应用自噬抑制剂3-MA及自噬诱导剂雷帕霉素，阐明LPS诱导凋亡发生的途径；（10）应用CRISPR Cas9 技术，探究过表达或敲除 ZC3H4 对自噬及凋亡的作用；（11）通过脑微注射Iba-1-Cre-AAV腺相关病毒至ZC3H4flox/flox鼠海马脑区特异性敲除海马脑区小胶质细胞中的ZC3H4，探究ZC3H4对LPS诱导的小胶质细胞自噬及凋亡的影响。
　　结果：（1）脑微注射circDYM过表达慢病毒至海马脑区可显著改善LPS诱导的小鼠抑郁样行为，降低小胶质细胞自噬水平，促进小胶质细胞存活；（2）过表达circDYM阻止CEBPB入核，从而抑制小胶质细胞自噬和凋亡、促进存活；（3） circDYM可以逆转LPS诱导的炎性模型中ZC3H4的表达下调；（4）CEBPB通过转录调控抑制 ZC3H4 表达；（5）LPS 处理小胶质细胞，24 h 自噬相关蛋白（BECN1 和 LC3B-II）表达增加，P62 表达降低，36 h 凋亡相关蛋白（Bax 和Caspase3）表达增加，Bcl-xl表达降低；应用自噬抑制剂及诱导剂，发现小胶质细胞自噬诱发凋亡；（6）过表达ZC3H4抑制自噬，促进细胞存活；而敲减ZC3H4促进细胞自噬和凋亡；（7）特异性敲除小鼠海马脑区小胶质细胞ZC3H4促进LPS诱导的自噬及凋亡水平升高。
　　结论：circDYM通过靶向结合CEBPB促进ZC3H4的表达，上调circDYM可通过 circDYM/CEBPB/ZC3H4 轴抑制小胶质细胞自噬介导的凋亡。本研究揭示了circDYM 对LPS诱导的小胶质细胞凋亡的调控作用及其机制，为明确小胶质细胞介导的神经炎症相关疾病病理机制提供研究基础。