氯霉素-量子点免疫层析试纸条的研制及应用

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我国是水产品生产和消费大国,水产品质量安全至关重要。氯霉素抗菌广谱、作用周期长、易吸收,常被非法用于水产品养殖过程中防治多种细菌性疾病,增加了水产品的安全风险。所以,建立一种简单、快速、灵敏的氯霉素检测方法对保证水产品安全具有重要意义。锰掺杂硫化锌量子点(Mn-Zn S QDs)具有荧光寿命长、潜在毒性低等优异特性,是当前研究较热的荧光标记物。本文论文以谷胱甘肽(GSH)作为稳定剂,利用直接水相合成法制备了表面具有羧基基团的Mn-Zn S量子点,电镜结果显示制备的QD粒径约4.5 nm。以羧基化QD为标记物,在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)的活化作用下与氯霉素抗体的共价连接,制备性能优良的荧光免疫探针,确定量子点与氯霉素抗体最佳反应比为1:100(质量比)。通过优化样品垫、NC膜、缓冲液、T线和C线浓度等条件,确定构建量子点免疫层析试纸条的最佳组合为:玻纤GF-08,Pall170NC膜,PBST缓冲液,化纤浓度为1.0 mg/m L。最优化条件下,该试纸条检测灵敏度为150 ng/m L,与氧氟沙星、诺氟沙星、洛美沙星、培氟沙星和加替沙星(浓度皆为1000 ng/m L)均无明显的交叉反应,试纸条的特异性较好;应用该试纸条检测水产品中鳗鱼样品中氯霉素的残留检出限为450 ng/g,可在15 min内完成快速检测。与中华人民共和国水产行业标准中气相色谱分析法相比(检测限为0.3μg/kg),该方法过程简单,检测时间短且适合现场快速检测。
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