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目的:药物成瘾是一种以强迫性觅药、用药行为为特征的慢性复发性脑病。虽然目前对药物成瘾的研究已经进行的广泛而深入,但仍然没有找到有效的治疗药物。研究表明,药物成瘾和学习记忆间具有密切关系,作为记忆形成重要基础的谷氨酸能神经元突触后膜的长时程增强(LTP)和长时程抑制(LTD)通过改变突触后膜的兴奋性参与了行为敏化和复吸等与药物成瘾相关的行为可塑性改变。因此,谷氨酸能系统,特别是NMDA受体在药物成瘾的研究中得到了越来越多的重视。以前的研究发现竞争性和非竞争性NMDA受体拮抗剂能够抑制吗啡、可卡因和苯丙胺诱导的位置偏爱效应,但这两类NMDA受体拮抗剂大多都产生严重的副作用；而且,以往的研究表明这两类拮抗剂本身具有奖赏效应。与此相反,NMDA受体甘氨酸位点拮抗剂不产生上述副作用,也无奖赏效应。本实验利用条件性位置偏爱(CPP)模型,在可卡因奖赏记忆形成的不同阶段用NMDA受体甘氨酸位点拮抗剂7.氯硫代犬尿烯酸(7-CTKA)进行干预,观察NMDA受体甘氨酸位点在可卡因奖赏记忆中的作用。
方法:1、大鼠4组(n=10)训练可卡因CPP(10mg/kg i.p.,训练时间45min),并在CPP训练第1、3、5、7天训练前10min分别在双侧VTA/NAc微注射vehicle(DMSO:双蒸水=1:9)和7-CTKA(5μg/μl)1μl/side,第2、4、6、8天不给予核团微注射,观察7-CTKA对可卡因CPP形成的影响。2、大鼠4细(n=8),分别在VTA/NAc微注射Vehicle(DMSO:双蒸水=1:9)和7-CTKA(5μg/μl)1μl/side,10min后给予大鼠cocaine(10mg/kg i.p.),并在给药后立即将大鼠放入自发活动箱,检测7-CTKA对自发活动是否有影响。3、大鼠4组(n=10)进行可卡因CPP训练(10mg/kg i.p.,训练时间45min)后24小时,分别在各组大鼠VTA/NAc微注射Vehicle(DMSO:双蒸水=1:9)和7-CTKA(5μg/μl)1μl/side,10min后进行CPP值测定；第一次测试后24小时重复测定CPP值,观察可卡因CPP能否重现。4、4组大鼠(n=9)进行可卡因CPP训练(10mg/kg i.p.,训练时间45min)后24小时测定大鼠的CPP值,将大鼠从CPP箱中取出后立即给予VTA/NAc微注射vehicle(DMSO:双蒸水=1:9)和7-CTKA(5μg/μl)1μl/side。在第一次CPP测定后24d、时、1周和2周后分别进行CPP测定,待CPP值明显消退后,给予大鼠小剂量cocaine(5mg/kg i.p.)进行点燃,观察消退的CPP能否重现。
结果:1、与对照组相比,7-CTKA-VTA组未形成CPP；而7-CTKA-NAc组与空白对照组比没有显著性差异,提示在VTA脑区给予7-CTKA(5μg/side)阻断NMDA受体的甘氨酸位点可以破坏大鼠可卡因条件性位置偏爱的获得；但在NAc脑区给予同样剂量的7-CTKA却没有此作用。2、与对照组相比,7-CTKA-VTA和7-CTKA-NAc组大鼠的自发活动均无显著性差异,表明通过VTA或NAc微注射NMDA受体甘氨酸位点拮抗剂7-CTKA(5μg/side)并未影响大鼠的自发活动。3、与对照组相比,7-CTKA-VTA组大鼠未能表达显著的CPP,而7-CTKA-NAc组则形成了显著的CPP,提示在VTA脑区微注射7-CTKA(5μg/side)阻断了可卡因奖赏记忆的唤起,抑制了大鼠可卡因CPP的表达,在NAc脑区给药却无此作用。4、与对照组相比,CPP唤起后立即在VTA给予5μg/side的7-CTKA,可以破坏已经形成的CPP,且两周后给予5mg/kg可卡因不能使CPP复现；而在NAc脑区给药却无上述作用,提示在VTA微注射7-CTKA破坏了可卡因奖赏记忆的再巩固过程,且这一抑制作用至少持续2周。
结论:通过VTA核团微注射NMDA受体甘氨酸位点拮抗剂7-氯硫代犬尿烯酸(7-CTKA)破坏了可卡因奖赏记忆的获得、唤起、再巩固过程；小剂量(5mg/kg)的可卡因可以使大鼠已经消退的CPP复现,VTA微注射7-CTKA可以抑制可卡因的这一点燃作用,而在NAc给予同样剂量的7-CTKA却无上述作用。