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【研究背景】 原发性胆汁性胆管炎（primary biliary cholangitis, PBC）是一种慢性进行性肝内胆汁淤积性疾病，发病机制尚不清楚。研究显示PBC患者一级亲属发病率较普通人升高近100倍，且其同卵双胞胎共患病率达77%，远高于其他自身免疫性疾病，提示遗传因素在PBC的发生发展中发挥重要作用。 近年来，围绕PBC的遗传研究出现了很多新的突破和进展。包括先前发现的与PBC发病密切相关的人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）基因，以及新近通过全基因组关联分析（genome-wide association studies，GWAS）发现的40余个非 HLA易感位点。然而这些位点尚不能充分解释 PBC 的发病机理。并且上述研究主要针对大样本的散发人群，极少涵盖家系病人的遗传分析。 本研究将依据PBC的家族聚集特点，筛查PBC家系患者，比较分析家系患者与散发患者各类临床指标及疗效的差异，并采用全外显子组测序技术筛选高度聚集家系患者的共同低频突变，初步探讨PBC家系患者的发病机制。 【研究目的】 1. 筛查PBC家系患者，分析家系患者与散发患者各类临床指标及疗效的差异。 2. 利用全外显子组测序技术寻找 PBC 家系患者共同的低频突变位点，并在散发人群中进行验证。 【研究方法】 本研究纳入自2005年至2016年我院确诊的PBC患者435例（分属435个不同的家系），根据其一级亲属自身抗体等检查结果明确诊断，筛选出 PBC 家系患者。收集 PBC 家系患者及散发患者治疗前及治疗后 12 个月的临床相关检查资料，比较两组患者在血清生化指标、治疗后的生化应答及预后评分等方面的差异。为了进一步证实PBC家系的特殊遗传背景，采用全外显子测序技术对两个高发家系进行测序，筛选家系患者共同低频突变，并于散发人群中验证，初步探讨家系患者的遗传致病机理。 【研究结果】 1. 共计筛查435例PBC患者（家系）及其946例一级亲属，其中18例一级亲属被诊断为PBC，共分布在16个家系中，则PBC一级亲属患病率为1.90%（18/946）， PBC家系患病率为3.68%（16/435）； 2. PBC家系患者组与散发患者组在治疗前RBC、HGB、PLT、ALT、AST、ALB、GLB、TBIL、ALP、GGT、CHO、TG、BUN、CRE、AMA、AMA-M2、抗SP100、抗GP210等方面均无明显差异，UDCA治疗一年后同样无明显差异。但PBC家系患者组的组织学分期显著低于 PBC 散发患者组，且发病年龄更为年轻。分别依据巴黎I、巴黎II及巴塞罗那标准对两组PBC患者进行疗效判定，结果显示：PBC家系患者组的生化应答率分别为69.6%、65.2%及73.9%，高于PBC散发患者组的54.5%、45.8%及65.6%；依据UK-PBC risk score对两组患者进行预后评估，发现家系患者组的风险评分低于散发患者组。 3. 根据家系内 PBC 患者数量和代数尽量多的原则，从 16 个 PBC 家系中筛选出 2个既有同代又有隔代患者的高发家系（6名PBC患者及2名正常对照）进行全外显子组测序。测序发现两个家系的患者均存在位点 rs79267778（HELZ2），该位点为以往报道的PBC易感位点。同时，测序筛查到家系1患者共同低频突变319个，家系2患者共同低频突变355个，两家系患者共同低频突变18个，包括16个SNPs和2个Indels，分别位于ANO2、LILRA6、HMGB1、CIB1、SAMD4A、DNASE1L1、FPR1、PDZK1IP1等14个基因上。 4. 经功能分析锁定1个（LILRA6）与自身免疫性疾病发病高度相关及2个（ANO2， CYP3A43）与胆汁排泄、代谢高度相关的候选基因。针对上述3个候选基因SNP位点设计 MassARRAY 芯片：位点 rs17788563 （ ANO2 ），位点 rs147270307 （CYP3A43）、rs183707190（LILRA6），再从PBC生物样本库中挑选的249名散发PBC患者中进行验证。结果发现，位点rs147270307（CYP3A43）测序结果与1000GENOME 中汉族人群基因频率相比，差异具有统计学差异，即 rs17788563可能与PBC的发病相关。 【研究结论】 1. PBC具有家族聚集现象，且一级亲属发病风险明显高于普通人群； 2. PBC家系患者较散发患者组织学分期较轻，生化应答率及预后较好，其原因是家系患者接受早期筛查，因此对PBC家系进行早期筛查具有非常重要的临床意义； 3. PBC 家系患者具有共同的易感位点 rs79267778 （ HELZ2 ）、rs147270307 （CYP3A43），可能与PBC的发病密切有关。