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苦瓜皂甙、多糖是苦瓜中的主要功能性成分,本文以新鲜苦瓜为原料,研究了苦瓜中这两种有效成分的复合酶解提取、分离及纯化等工艺条件,探索出了一条较为成熟的提取分离工艺路线。 以苦瓜中含量最多的活性成分—苦瓜皂甙的提取量为指标,研究了单因素水平如酶添加量、提取时间、提取温度及pH值对苦瓜皂甙提取量的影响,在此基础上设计了四因素三水平的正交试验,得出了苦瓜皂甙提取的优惠工艺条件:温度60℃,酶加量1.4%,pH值5.0,料水比1:4,在该条件下测定了苦瓜皂甙的提取量为0.2953g/L,以及苦瓜多糖的最终得率0.15%左右。 通过对大孔吸附树脂进行筛选,最终选定LSA-20树脂用于苦瓜皂甙的纯化。首先,通过静态实验,确定了在料液pH为9、浓度为0.5mg·mL-1的条件下树脂对苦瓜皂甙具有最佳吸附性,浓度为80%乙醇对苦瓜皂甙具有最佳洗脱效果。其次,通过动态实验对树脂柱的吸附、解析性能进行研究,确定了树脂柱的吸附、洗脱速度为1.41×10-4m/s,在此条件下可处理20BV的原料液,用4BV的洗脱剂就可以基本洗脱下来。所得产品中苦瓜皂甙含量为76.9%。 本研究采用醇沉法对苦瓜提取液进行预处理。实验表明:按3:1的体积比加入95%乙醇（95%乙醇体积:滤液体积=3:1）可沉淀苦瓜多糖,防止了树脂污染、提高了皂甙纯度,而且还可以生产苦瓜多糖。 建立了苦瓜有效成分浸提过程的动力学模型,拟合出的线性方程计算得苦瓜皂甙浸提（提取优惠工艺条件下）的动力学常数k值约为0004min-1。所建立的动力学方程能较好地描述本浸提试验。 本研究的复合酶解提取、醇沉、大孔树脂吸附纯化新工艺,与目前已有的工艺相比,具有两种有效成分综合提取,提取快速、条件温和等特点;避免了耗时的溶剂高温提取,减少溶剂消耗;有利于降低活性损失;同时避免引入有害的有机物质。