锶修饰的3D rGO/PPY复合支架的构建及其体外成骨性能研究

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目的:构建锶修饰的3D rGO/PPY复合支架,并评价体外成骨活性,为其临床应用提供一定的实验依据。材料和方法:以课题组前期研究的三维还原氧化石墨烯/聚吡咯(3D rGO/PPY)复合支架为基底[1],采用聚多巴胺为交联剂,应用浸泡法将Sr偶联修饰到支架表面。分别采用SEM、XPS、EDS对Sr修饰前后3D rGO/PPY复合支架的结构形貌、化学组成和元素分布进行表征。分别采用MTT、AO/EB荧光双染和SEM评估复合支架对MC3T3-E1细胞早期粘附、增殖及细胞形态的影响,采用碱性磷酸酶(ALP)活性测试和茜素红染色对其体外成骨能力进行评估。结果:1、物理表征:SEM观察3D rGO/PPY复合支架为三维交联大孔状结构,孔径为200-400μm,锶均匀分布在支架表面。EDS和XPS结果表明3D rGO/PPY复合支架主要由C、O、N元素组成,检测到-NH2,间接说明PDA涂层存在,可在133.7 eV处检测到Sr 3d波峰,证明Sr修饰成功。2、体外成骨性能评价:MTT结果显示锶修饰的3D rGO/PPY复合支架表面细胞数量增多。SEM显示细胞铺展性好,有较长的伪足伸展。AO/EB荧光双染也表明锶修饰的3D rGO/PPY组细胞数量>3D rGO/PPY/PDA组>3D rGO/PPY组。ALP活性测定7天,14天后3D rGO/PPY和3D rGO/PPY/PDA组的ALP活性水平表达无明显差异,但Sr修饰3D rGO/PPY组ALP的活性水平OD值分别为1.95和3.46,高于3D rGO/PPY/PDA组的1.08和2.3(P<0.01)及3D rGO/PPY的0.94和2.10(P<0.01)。茜素红染色结果显示锶修饰的3D rGO/PPY组有大范围红染区域,大量的钙结节生成。结论:成功制备了锶修饰的3D rGO/PPY复合支架,能促进MC3T3-E1细胞粘附和增殖,诱导MC3T3-E1细胞成骨向分化。
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