【摘 要】
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得克隆（Dechlorane Plus,DP）是一种使用广泛的新型氯代阻燃剂,可以在环境中持久存在,并在生物体内富集。本课题组前期研究表明DP具有类雌激素效应,可引起人乳腺癌细胞MCF-7的增殖。卵巢癌是雌激素依赖的高致死性女性癌症,某些环境雌激素类物质可导致其形成和恶化。研究表明肿瘤干细胞（Cancer Stem Cell,CSCs）与肿瘤的形成、侵袭和转移密切相关。本论文将探讨环境相关浓度DP
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得克隆（Dechlorane Plus,DP）是一种使用广泛的新型氯代阻燃剂,可以在环境中持久存在,并在生物体内富集。本课题组前期研究表明DP具有类雌激素效应,可引起人乳腺癌细胞MCF-7的增殖。卵巢癌是雌激素依赖的高致死性女性癌症,某些环境雌激素类物质可导致其形成和恶化。研究表明肿瘤干细胞（Cancer Stem Cell,CSCs）与肿瘤的形成、侵袭和转移密切相关。本论文将探讨环境相关浓度DP对人卵巢癌细胞活性及干细胞特性的影响。采用环境相关浓度DP(10-5-10-10M)暴露处理人卵巢上皮性癌细胞OVCAR-3,以雌二醇（Estradiol,E2）为阳性对照。暴露24和48小时后,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期。利用细胞成球实验,探究不同浓度DP对OVCAR-3干细胞球形成的影响。选取对细胞成球具有显著效应的DP浓度再次进行暴露处理,采用RT-q PCR和Western Blot对CSCs生物标志物及Wnt/β-catenin信号传导通路中的标志蛋白β-catenin进行定量分析。CSCs生物标志物分别选取与卵巢癌CSCs发生、转移和化疗耐药性风险相关的ALDH1、CD133,以及与卵巢癌干细胞特性维持相关的NANOG、OCT4、SOX2。细胞活性和周期检测发现,DP对OVCAR-3细胞生长具有非单调剂量-效应关系:高浓度(10-7M)DP暴露可以上调细胞增殖指数,导致细胞活性增加;低浓度(10-10M)DP暴露显著降低细胞增殖指数,导致细胞活性降低。不同浓度DP暴露对OVCAR-3干细胞球形成的影响不同:10-7和10-8M DP可显著提高细胞成球率,且干细胞球的直径明显大于对照组;10-10M DP可显著降低干细胞球的形成。对CSCs生物标志物和Wnt/β-catenin通路的定量初步揭示了不同浓度DP暴露对OVCAR-3干细胞特性影响不同的分子机制:10-7M DP暴露显著上调了CSCs生物标志物ALDH1、CD133、NANOG、OCT4及SOX2的转录水平,导致NANOG和SOX2蛋白水平的显著上调,激活Wnt/β-catenin通路,促进OVCAR-3细胞的干细胞化;而10-10M DP暴露则刚好相反,下调了CSCs生物标志物的基因转录和蛋白表达,抑制Wnt/β-catenin通路,引起OVCAR-3细胞的干细胞化减弱。本论文的研究结果表明DP具有复杂的生物学作用,环境浓度的DP会对卵巢癌细胞的增殖和干细胞化产生潜在的影响。这些基础数据将为全面了解DP的毒性,进而为客观评价其生态风险提供科学依据。
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