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目的 观察水蛭提取液对体外培养的牛晶状体上皮细胞(LEC)生长、贴壁及在人工晶状体(IOL)表面黏附生长的影响,探讨中药水蛭用于防治后发性白内障的可能性。 方法 1、采用植块培养法,对牛晶状体前囊膜进行培养,并利用形态学观察和体外培养LEC特异性的“晶状体小体”进行细胞鉴定。 2、利用五种常用水蛭提取方法(水醇双提法、乙醇回流法、水提法、水提醇沉法、渗滤法)提取液。观察体外培养的LEC,加入不同浓度的各种提取液培养24h、72h后的生长情况,以MTT法测定OD值,并求出半效抑制量(ID50)。 3、传代的LEC加入各种提取液高剂量(ID50)及低剂量(1/10ID50)培养24h,观察贴壁抑制情况。 4、接种LEC到PMMA材质的IOL表面,并加入各种高剂量和低剂量提取液。培养24h后,观察IOL表面LEC的黏附生长抑制情况。 结果 五种水蛭提取液抑制LEC生长的24h、72hID50介于20.56mg/ml至68.78mg/ml之间,其中水提醇沉液、渗滤液具有更明显生长抑制作用(P<0.05);与空白组比较,水蛭水醇双提液、水提醇沉液、渗滤液对LEC贴壁和在IOL表面黏附生长有明显抑制作用(P<0.01或P<0.05)。 结论 五种水蛭提取液均能抑制体外培养的LEC生长,其中水提醇沉液、渗滤液具有更明显生长抑制作用;水蛭水醇双提液、水提醇沉液、渗滤液对LEC贴壁和在IOL表面黏附生长有明显抑制作用;水蛭水提成都中医药大学硕士研究生学位论文醇沉液、渗滤液能同时明显抑制体外培养的LEC生长、贴壁及在IOL表面猫附生长;实验为水蛙提取液用于防治后发性白内障提供了实验依据。