【摘 要】
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随着家禽养殖业的不断发展和壮大,对家禽传染性疾病的防治越来越受到人们的重视。禽网状内皮组织增生病病毒（REV）目前依然缺乏行之有效的商业化疫苗,感染该病毒后会导致家禽的免疫抑制,并与其他病原一起造成混合感染,严重影响了家禽养殖业的健康发展。本次研究中,以1日龄SPF雏鸡做为试验动物,将雏鸡随机分为两组,分别是禽网状内皮组织感染组（I组）和病毒感染阴性对照组（C组）。应用western blot、化
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31472169）；
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随着家禽养殖业的不断发展和壮大,对家禽传染性疾病的防治越来越受到人们的重视。禽网状内皮组织增生病病毒（REV）目前依然缺乏行之有效的商业化疫苗,感染该病毒后会导致家禽的免疫抑制,并与其他病原一起造成混合感染,严重影响了家禽养殖业的健康发展。本次研究中,以1日龄SPF雏鸡做为试验动物,将雏鸡随机分为两组,分别是禽网状内皮组织感染组（I组）和病毒感染阴性对照组（C组）。应用western blot、化学荧光检测、酶活性检测等方法,并结合组织病理学和超微病理学检测技术,通过探究提取的纯化线粒体膜电位及其通透性,检测细胞凋亡相关因子活性和蛋白含量,观察法氏囊病理变化。通过上述检测,系统性地对SPF雏鸡感染禽网状内皮组织增生病病毒后,其法氏囊细胞的上述各项相关被检指标进行检测或观测,主要结果如下:（1）REV感染SPF雏鸡后14-21天和第35天,其法氏囊细胞线粒体膜电位极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）低于对照组;而线粒体膜通透性在病毒感染后14-28天极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于对照组;法氏囊细胞胞Cyt-C蛋白含量在病毒感染后21-35天均极显著（P＜0.01）高于对照雏鸡。表明REV感染SPF雏鸡法氏囊细胞胞浆中Cyt-C蛋白含量增加与线粒体膜电位降低及其通透性增高密切相关。（2）REV感染SPF雏鸡后第21天和35天,其法氏囊细胞中Caspase-3酶活性极显著（P＜0.01）或显著（P＜0.05）高于对照组;尽管REV感染雏鸡的Caspase-9酶活性于病毒感染后的7-35天病毒均高于对照组雏鸡,但数据未得到统计学支持（P＞0.05）。表明Caspase-3参与了禽网状内皮组织感染感染所致的雏鸡法氏囊细胞凋亡。（3）SPF雏鸡受到REV感染后,感染雏鸡的法氏囊细胞中Bcl-2蛋白含量在病毒感染后14-35天明显（P＜0.05或P＜0.01）高于对照雏鸡,而Bax蛋白含量以及Bax/Bcl-2值于病毒感染后14-35天明显（P＜0.05或P＜0.01）高于对照雏鸡;BID蛋白的含量在SPF雏鸡被REV病毒感染后的第7天以及第35天相比照组雏鸡极显著（P＜0.01）增高;tBID蛋白质含量和tBID/BID值在病毒感染后7-35天均极显著（P＜0.01）高于对照雏鸡;对照组雏鸡的Fas蛋白含量在REV感染后第7天和21-35天明显（P＜0.05或P＜0.01）低于感染组雏鸡;Fas L蛋白含量在感染病毒后7-35天均极显著（P＜0.01）高于对照雏鸡。表明上述被检生物活性因子的病理性改变与REV感染所致SPF雏鸡法氏囊细胞凋亡密切相关。（4）REV感染SPF雏鸡法氏囊淋巴细胞变性、凋亡样死亡,数量明显减少;纤维结缔组织明显增加;法氏囊超微结构观察发现,组织细胞中出现凋亡小体;部分细胞线粒体肿胀、破裂,细胞核染色质边集。表明REV感染导致的SPF雏鸡法氏囊组织结构损伤、淋巴细胞数量显著减少主要由细胞凋亡而引起。（5）REV感染SPF雏鸡后7-35天,禽网状内皮组织感染雏鸡的体重虽然都低于对照组雏鸡,但未找到统计学意义（P＞0.05）;法氏囊器官指数在病毒感染后的第14-28天显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）低于对照组雏鸡。表明REV感染导致SPF雏鸡法氏囊发生萎缩。综上研究结果可知,REV感染SPF雏鸡后,可导致其法氏囊细胞在线粒体途径上发生凋亡,本研究为深入阐明禽网状内皮组织增生病病毒的致病机制以及探究病毒感染如何引发雏鸡免疫抑制提供新的思路。
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