论文部分内容阅读
[背景与目的]锯齿状病变是一组以上皮呈锯齿状结构为特征的结直肠息肉/腺瘤,因其具有恶变为结直肠腺癌的潜能,近年来日益受到临床病理学工作者的关注。2010年新版WHO消化系统肿瘤分册将锯齿状息肉和息肉病明确分为增生性息肉(Hyperplastic polyps,HPs),广基锯齿状腺瘤/息肉(Sessile serrated adenoma/polyp,SSA/P),传统锯齿状腺瘤(Traditional serrated adenoma,TSA)三种类型。其中TSA和SSA具有明确恶变潜能,不同类型的HPs与也有类似于TSA及SSA的基因改变。锯齿状通路是一个多因素、多阶段、多基因改变渐进性累积的复杂过程,在此演变过程中涉及多种癌基因和抑癌基因,具体的发病机制迄今未完全明了。Runx转录因子3 (Runt-related transcription factor 3,RUNX3)基因是近年来新发现的一种抑癌基因,已被证实在多种人类肿瘤中存在RUNX3基因的异常。有研究发现RUNX3基因与人类消化系统肿瘤的发生关系更为密切,但是RUNX3基因在锯齿状病变发生和恶变过程中的作用尚不明确。RUNX3位于人类染色体的1p36.1,主要表达于消化道上皮细胞、血液细胞、间叶细胞、神经细胞等。已有研究证实RUNX3基因通过调节细胞周期和诱导细胞凋亡对肿瘤造成抑制,RUNX3基因的失活可能会造成癌症的发生。目前关于RUNX3在结肠癌中的作用已有不少文献,但有关RUNX3在锯齿状病变中作用的研究报告很少,国外Subramaniam等曾通过免疫组织化学方法比较发现HP和TSA中RUNX3的阳性表达较正常结肠组织和管状腺瘤(Tubular adenoma,TA)中有所下降,而国内尚没有对RUNX3在锯齿状病变中的研究报告。本研究通过观察锯齿状病变在RUNX3的免疫组织化学表达以及分析锯齿状腺瘤(Serrated adenoma,SA)中RUNX3(rs2236851,C/T)位点多态性,并观察上述两者的关系,从而对RUNX3在锯齿状病变发生与癌变途径中的作用进行初步探讨。[方法]收集北京军区总医院、海军总医院、解放军第二五二医院、河北省巨鹿县医院、北京中医药大学东直门医院2002年10月至2009年9月间病理诊断为结直肠各类息肉和腺瘤切片共5347例,所有切片按WHO及文献标准,3名病理医师4—5轮阅片,从中筛选出锯齿状病变共258例。对上述258例锯齿状病变进行组织学诊断及分类,从中筛选出TSA32例,SSA/P 8例,HP25例,并收集大肠癌(Colorectal cancer,CRC) 20例、TA25例、正常大肠组织25例作为对照组,所有组织切片均进行免疫组织化学染色,观察RUNX3的表达情况。另从上述258例锯齿状病变中随机挑选出50例SA(包括TSA40例,SSA/P10例)作为实验组,并收集正常大肠组织20例作为正常对照组,运用PCR-SSP方法研究RUNX3(rs2236851,C/T)的多态性;并从SA实验组中随机抽取30例SA进行免疫组织化学染色,运用IPP图像分析系统进行免疫组织化学阳性表达的半定量分析,分析基因型与RUNX3表达之间的关系。[结果]对RUNX3在正常组、TA组、HP组、TSA组、SSA组以及CRC组的免疫组织化学表达进行统计学分析,结果显示:RUNX3在TSA、SSA、大肠癌三组阳性率比正常对照组明显降低,差异具有统计学意义;RUNX3在SSA组与TA组之间、CRC组与TA组之间也具有统计学差异。TSA组与TA组之间虽然没有统计学差异,但TSA组RUNX3阳性表达率明显低于TA组。对RUX3基因rs2236851位点多态性分析及IPP图像分析系统半定量分析显示:SA实验组T等位基因的频率明显高于正常对照组,RUNX3基因rs2236851位点可能与SA密切相关;分析SA基因型与RUNX3表达的关系发现TC基因型SA患者的RUNX3阳性表达明显降低。[结论]1.免疫组织化学结果显示RUNX3在锯齿状病变中表达阳性率降低,提示其可能是SA发生和恶变过程中的必要条件。2.基因多态性分析结果提示RUNX3 (rs2236851, C/T)位点可能与SA密切相关,TC基因型SA患者的RUNX3阳性表达降低更明显。[背景与目的]锯齿状病变是一组以上皮呈锯齿状结构为特征的结直肠息肉/腺瘤。2010年版WHO消化系统肿瘤分册将锯齿状病变明确分为增生性息肉(Hyperplastic polyps,HPs),广基锯齿状腺瘤/息肉(Sessile serrated adenoma/ polyp,SSA/P),传统锯齿状腺瘤(Traditional serrated adenoma,TSA)三种类型。其中HP根据粘液类型又分为微小泡状型HP(microvesicula HP,MVHP)、杯状细胞型HP(goblet cellric HP,GCHP)、粘液缺乏型HP(mucin poor HP,MPHP);SSA/P根据细胞异型性分为不伴细胞异型增生型SSA/P及伴有细胞异型增生型SSA/P。近来,在锯齿状病变中,有研究者发现存在一类形态更为特殊的锯齿状病变,其形态除具有典型的锯齿状结构外,还兼有长纤维绒毛状突起的特征。2010年版WHO消化系统肿瘤分册将这类锯齿状病变归为TSA中较罕见的一个亚型,称作“纤维绒毛锯齿状腺瘤”(Filiform serrated adenoma,FSA)。目前国内外对FSA的了解与研究甚少,多数病理及临床医师对其更是鲜有认识。因此本研究通过探讨FSA的临床病理学形态学特征以及免疫组织化学特征,旨在增强对FSA的认识,加强对患者的预后管理。[方法]收集北京军区总医院、海军总医院、解放军第二五二医院、河北省巨鹿县医院、北京中医药大学东直门医院2002年10月至2009年9月间病理诊断为结直肠各类息肉和腺瘤切片5347例,所有切片按WHO及文献标准,3名病理医师4-5轮阅片,从中筛选出FSA共18例,同时收集临床相关资料并观察病理学特征。对FSA11例,NFSA20例(其中TSA15例, SSA/P5例),HP20例,VTA20例分别进行免疫组化Ki-67、p53、β-Catenin、CK7、CK20、CDX-2、RUNX3染色。[结果]观察结果显示FSA占所收集全部结直肠息肉/腺瘤的0.34%,占锯齿状病变的6.98%;FSA多发于老年人,部位多位于左半结肠,尤其直肠部位。组织学观察结果显示其表面可见许多细长的纤维状绒毛状突起,隐窝被覆有异型增生的上皮细胞,伴有典型锯齿状改变;该类突起形似绒毛管状腺瘤,但其长度比绒毛管状腺瘤长;多数病例的突起末端可见明显间质水肿,严重者膨大呈“球茎”状改变;FSA异型增生程度较NFSA、VTA要高,差异有统计学意义。免疫组织化学染色结果显示p53、Ki-67、RUNX3在FSA中的表达与其他组间存在统计学差异;β-Catenin、CK7、CK20、CDX-2在FSA中的表达与其他组间未见统计学差异。[结论]1.FSA是特殊类型的锯齿状腺瘤,多发于左半结肠尤其直肠部位。2.病理形态学观察结果提示FSA以“长纤维绒毛”的典型特征区别于其他锯齿状病变。与NFSA、VTA相比,其异型增生程度更高。3.免疫组织化学结果提示FSA具有较高增殖活性,Ki-67在FSA中的表达提示FSA可能具有更高的恶变潜能。