水产品中微囊藻毒素的高效液相色谱检测方法的研究

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近年来随着淡水湖泊污染的加剧和全球气温变暖的影响,蓝藻水华爆发,蓝藻衰败过程中释放的有毒微囊藻毒素(Microcystins,MCs),具有强烈的促癌作用,不仅威胁到饮用水安全,还会在水产品内富集,威胁人类健康。建立一种有效实用的监测MC的方法,用于评价其对人类健康潜在危害非常重要。本文针对目前水产品中微囊藻毒素检测的研究现状,从以下几个方面展开研究工作:1)建立一种反相高效液相色谱法对水产品中MC进行分离检测的方法。通过考察色谱柱、柱温和流动相组成等因素对MC分离的影响,优化了色谱条件。采用二极管阵列检测器,在238 nm波长下进行检测,方法检出限为33.3 ng/g。线性范围较好,灵敏度高,结果可靠。2)研究了成分较复杂的水产品中MC的提取、净化和富集等样品处理方法。对提取溶剂、提取方法、固相萃取柱、淋洗液及洗脱液等条件进行了研究优化。最终选择以85%甲醇溶液为提取溶剂,用Envi C18固相萃取柱对提取液进行净化。各类水产品处理后使用高效液相色谱检测,对样品的加标回收实验结果良好,并通过LC /MS对含MC蛳螺进行确证分析。MC-RR的加标回收率为70.5~85.8%,相对标准偏差小于5.6%;MC-LR的加标回收率为69.3~84.7%,相对标准偏差小于5.5%。3)应用本研究建立的分析方法对多种水产品样品进行了分析检测。通过对多种水产品样品中MC进行分离检测和风险评估,以期建立一种简便、快速、高灵敏度、准确可靠、易于推广的检测方法。除此以外,尝试新的生物毒性检测方法—发光细菌法来检测水体和水产品中MC的生物毒性。
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