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背景与目的多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是一种中枢神经系统慢性炎症性脱髓鞘疾病,其发病原因不明,以空间和时间的多发性为其特征表现。对于MS的病因,目前尚缺乏确切的研究,相关流行病学资料研究显示MS是一种多因素综合作用的疾病,其中免疫调节机制紊乱在其发病过程中起重要的核心作用。近来研究发现由血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)参与的血脑屏障破坏、血管新生在MS的病程中具有重要作用,可能是MS病程呈慢性炎性脱髓鞘的主要原因。微小RNA(micro RNA,miRNA)是一类在人体内正常表达的短链非编码RNA,在细胞的增殖、分化、凋亡以及血管新生中具有重要的调控作用。近来研究显示在MS患者外周循环中可以检测到多种稳定表达的miRNA,且发现有多种miRNA表达量与正常对照者相比具有显著差异。由此认为检测外周循环中的miRNA的表达量变化对于MS的诊断和鉴别具有重要价值。本课题关注在多发性硬化复发组、缓解组和健康对照组血清中miR-199a-5p,miR-126、miR-200c和VEGF表达水平,分析MS患者各组之间miR-199a-5p,miR-126、miR-200c和VEGF的表达差异,探讨它们在多发性硬化病程中的相关性。方法1、针对45例多发性硬化复发组患者、37例多发性硬化缓解组患者和40例健康志愿者的血清标本,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)的方法,检测三组中VEGF的表达水平变化。2、针对45例多发性硬化复发组患者、37例多发性硬化缓解组患者和40例健康志愿者的血清标本,采用q PCR的方法,分别检测三组中miR-199a-5p,miR-126和miR-200c的表达水平变化。结果1、复发组患者血清VEGF表达量为50.75±11.31,缓解组为27.36±9.83,对照组为15.64±3.26。复发组和缓解组患者的VEGF表达量均高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05);复发组患者的VEGF表达量高于缓解组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。2、复发组患者血清miR-199a-5p表达量为0.54±0.13,缓解组为0.73±0.22,对照组为0.74±0.39。复发组miR-199a-5p表达量低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);缓解组miR-199a-5p表达量低于对照组,但差异没有统计学意义(P=0.235);复发组miR-199a-5p表达量较缓解组降低,且差异具有显著统计学意义(P=0.001)。3、复发组患者血清miR-126表达量为0.68±0.24,缓解组为1.29±0.61,对照组为1.04±0.58。复发组患者血清中miR-126表达量低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.001);缓解组血清中miR-126的表达量高于对照组,差异具有统计学意义(P=0.003);复发组血清中miR-126表达量较缓解组降低,差异具有统计学意义(P<0.001)。4、复发组患者血清miR-200c表达量为2.26±0.75,缓解组为0.99±0.57,对照组为0.76±0.42。复发组miR-200c表达量高于对照组,差异具有统计学意义(P=0.005);缓解组miR-200c的表达量高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.001);复发组miR-200c表达量较缓解组升高,差异无统计学意义(P=0.062)。5、MS患者血清miR-199a-5p与VEGF的表达水平的相关关系在复发组和缓解组中均呈负相关关系(r复发=-0.929,p复发=0.002;r缓解=-0.955,p缓解=0.000)。6、MS患者血清miR-126与VEGF的表达水平的相关关系在复发组呈负相关关系(r=-0.601,p=0.001),在缓解组呈正相关关系(r=0.893,p=0.000)。7、MS患者血清miR-200c与VEGF的表达水平的相关关系在复发组和缓解组均呈正相关关系(r复发=0.81,p复发=0.005;r缓解=0.843,p缓解=0.000)。结论1、miR-199a-5p在MS患者血清中表达量下调。2、miR-200c在MS患者血清中表达量上调。3、miR-126在MS患者不同病程时期表达量不同,复发期表达下调、缓解期表达上调。4、VEGF与MS的发病有关,VEGF水平愈高,MS愈趋向于复发。5、VEGF水平升高受miR-199a-5p下调、miR-200c上调以及miR-126上调或下调的调节,从而诱导MS发病,其中miR-199a-5p、miR-126可能作为MS复发鉴别的诊断指标,miR-200c可能作为MS的诊断指标。