本文研究发现,采用Penicillium purpurogenum Stoll BCRC31690菌株发酵产生的菊粉酶,具有内切菊粉酶活力,而几乎没有外切菊粉酶活力。在培养基中添加不同来源的碳源、氮源、盐及金属离子等营养成分,采用三水平全因子设计优化内切菊糖酶的生产工艺,试验结果采用SAS软件进行统计分析。优化后的培养基成分为(g/L):菊糖20,(NH4)SO4 5、KH2PO4 2.5、MgSO4.7H20 0.5,发酵温度24℃,发酵时间3d,pH 5.5发酵终止,获得菊糖酶的最高活性为2.65U/ml,最高I/S为21.8。分别以菊糖和蔗糖为底物,利用DNS,HPLC和I/S来测定和描述酶反应产生的还原糖和低聚果糖。通过硫铵沉淀、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换柱和Sepharose CL-6B凝胶柱对酶进行纯化。纯度及内切菊粉酶分子量用SDS-PAGE凝胶电泳进行测定。结果表明:经过纯化,SDS-PAGE电泳呈一条单带,表观分子量为62.88kDa,酶的最适pH和温度分别为5和55℃。以菊糖为底物,HPLC分析酶的反应产物中没有发现蔗糖单体,但是产品中有2-13个聚合度的低聚果糖。