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背景腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路是调节细胞能量状态的中心环节,其激活后可关闭消耗ATP的合成代谢途径,启动产生ATP的分解代谢途径,被称为“细胞能量调节器”。脂联素是一种由脂肪组织分泌的胶原样蛋白,具有调节脂肪酸和葡萄糖代谢、抗炎、减轻动脉硬化等多种生物学功能。AMPK是脂联素信号通路中的关键信号分子。肿瘤抑制因子LKB1是AMPK的上游激酶,可以磷酸化AMPK a亚单位活化环上的第172位苏氨酸(Thr172)进而激活AMPK。LKB1可与热激蛋白90(heat-shock protein 90,Hsp90)以及Hsp90的特异性亚基Cdc37形成复合物,而LKB1结合到Hsp90和Cdc37是稳定LKB1所必需的。根赤壳菌素是大环抗真菌抗生素,是一类Hsp90抑制剂,能够与Hsp90结合并十预其功能,从而影响LKB1的稳定性。脂联素和LKB1对AMPK活性有重要调节作用。目的研究脂联素是否通过LKB1激活SD大鼠肝脏组织AMPK,进而调节体内的能量代谢。方法(1)30只6周龄雄性SD大鼠随机分为2组：普通饮食组(NC组)与高脂饮食组(HF组)各15只。NC组给予普通饲料,HF组给予高脂饲料。16周喂养结束后禁食并处死大鼠。分别测定体重(Bw)、血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等代谢指标。采用ELISA方法测定血清总脂联素。Western blot方法检测肝脏组织中AMPKα、P-AMPK a和P-LKB1蛋白表达,计算AMPK活性(P-AMPKα/AMPKα)。(2)原代培养肝细胞,第四代肝细胞随机分为三组：脂联素组、根赤壳菌素+脂联素组和对照组,前两组分别给予脂联素(10μg/ml)、根赤壳菌素(10μmmol/l)+脂联素(10μg/ml)干预,对照组未进行任何干预。采用免疫荧光方法检测各组肝细胞中AMPKα、P-AMPKα和P-LKB1的含量。实验重复三次。两组和多组之间的差异性比较分别采用t-检验和单因素方差分析(ANOVA),相关性分析采用Pearson相关检验。结果(1)与NC组比较,HF组大鼠BW、FFA、TG、FPG和FINS均增高(P(0.05),TCH无明显变化(P>0.05)。(2)HF组血清中总脂联素水平降低(P(0.05)。(3)与NC组比较,HF组大鼠肝脏组织P-AMPKα减少,AMPK活性下降(P(0.05),AMPK a蛋白则无明显变化(P>0.05)。(4)HF组P-LKBl下降(P<0.05)。(5)血清总脂联素与P-AMPKα、P-LKB1呈正相关性,与大鼠BW.FFA.TG以及FPG呈负相关性。(6)原代肝细胞中,脂联素能增加P-LKB1表达(P(0.05)。(7)脂联素能激活原代肝细胞中AMPKα,而根赤壳菌素则抑制脂联素激活AMPKα(P<0.05).结论长期高脂饮食导致血清总脂联素水平下降,引起磷酸化的LKB1表达减少,降低肥胖SD大鼠AMPK的活性。脂联素可能是通过LKB1调节AMPK活性。