非小型细胞肺癌（NSCLC）的发病率和致死率不断增加,成为危害人们身体健康的主要原因。一些临床数据表明NSCLC前期几乎没有令人印象深刻的症状,直到它发展到晚期。目前NSCLC的治疗方法主要是化疗,其治疗范围广、效率高,但传统的单一化疗容易产生耐药性和副作用,所以临床上一般多采用联合用药。阿司匹林除了作为消炎药之外,逐渐以另一个身份出现:抗癌药。最初是对结肠癌有作用,通过进一步的研究,研究人员逐渐发现阿司匹林的抗肿瘤作用并不仅仅局限于结直肠癌症,而是扩展到乳腺癌、肝癌、前列腺癌等肿瘤疾病。但是,关于阿司匹林对肺癌的抗肿瘤作用报道很少,而且抗癌机制仍然不清楚。此外,在肺癌中,阿司匹林与其他抗癌药物联合使用还没有彻底探索过。塞来昔布是众所周知的COX-2选择性抑制剂,已报道塞来昔布在多种类型的人类和动物的癌细胞中发挥积极地抗肿瘤作用。因其发挥抗肿瘤作用需要高能浓度辅助,而这样的浓度会对机体产生严重的副作用。因此,塞来昔布需要和其他药物试剂联用以减少其使用剂量,同时可以达到杀死癌细胞治疗癌症的效果。在本研究第一部分,借助CCK8、EDU、流式细胞术、TUNEL、Transwell,wound-healing等实验技术,我们研究了塞来昔布和阿司匹林单独和联合使用对NSCLC细胞增殖、凋亡、周期和迁移的影响,并探索其可能存在的潜在机制。发现塞来昔布和阿司匹林联用能够显著抑制NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭及诱导其凋亡,比任何一种药物单独治疗的肿瘤效果更为明显。进一步深度探究分子作用机制,表明塞来昔布与阿司匹林联用主要是通过激活caspase-9/caspase-3、细胞周期G1停滞相关信号通路和抑制ERK MAPK信号通路来发挥抗肿瘤作用。此外,塞来昔布单独或联合阿司匹林能够通过抑制MMP-9的活性抑制NSCLC细胞的迁移和侵袭。论文第二部分,为了进一步确认阿司匹林在NSCLC细胞中的蛋白靶点,在Wang等人使用阿司匹林探针筛选并鉴定出523种蛋白靶点的基础上,我们运用化学蛋白组学、Pull-down、CDDOCKE分子对接技术、MST等实验方法,筛选并鉴定出GRP78很可能是阿司匹林在A549细胞中的靶蛋白。进一步探究信号通路发现阿司匹林通过抑制靶蛋白GRP78的表达,激活内质网应激反应,继而激活下游的半胱天冬蛋白酶信号通路和Bcl-2蛋白家族促凋亡蛋白的活性。本研究为阿司匹林和塞来昔布联合用于非小细胞肺癌的临床治疗提供了基础理论依据。