子痫前期患者肠道菌群失调及血清炎症因子的分析研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:feng_lingpeng
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背景与目的:子痫前期(Pre-eclampsia,PE)为孕期发生的的严重并发症,是母儿死亡的主要原因之一,具体发病机制尚不清楚。PE的特点是向持续炎症反应转变,伴有内皮功能障碍,驱动力是促炎细胞因子的上升。肠道菌群是生活在消化道中的微生物群落,对宿主的新陈代谢、免疫、营养吸收等有重要的影响。其失调可导致肠道屏障紊乱、细菌移位、机体产生炎症和氧化应激反应,这种改变可能与PE的发病有关。本研究通过对健康对照组(NP组)与子痫前期组(PE组)患者肠道菌群和外周血中炎症因子的研究,探讨二者的改变与PE炎症反应的相关性。希望为PE的诊疗、改善预后提供理论基础。方法:收集42例PE及20例NP孕妇的粪便标本、外周血样本及临床相关资料。采用DNA提取试剂盒提取粪便标本细菌DNA,以基因组DNA为模板,使用带barcode的细菌16S r RNA基因V3-V4区域的通用扩增引物,对获得的细菌DNA进行PCR扩增和产物纯化。基于Illumina-Misq高通量测序平台,采用16S r RNA高通量测序技术对细菌的V3-V4区域进行测序,并进行生物信息学分析。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中炎症因子水平。分析NP组与PE组间肠道菌群多样性的变化及血清炎症因子的差异。结果:1.与NP组相比,PE患者肠道菌群的α多样性下降,β多样性具有差异性;在门水平上,NP组和PE组主要以拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、变形杆菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、脱硫杆菌门(Desulfobacteria)、梭杆菌门(Fusobacteria)等菌门为主,其中Bacteroidetes及Firmicutes占据绝对性优势。2.采用LEFse分析探究NP组与PE组之间的差异菌群,PE组相对丰度较高的肠道菌群为梭菌属(Clostridium)、具核梭杆菌属(Fusobacterium)、Fournierella、普雷沃氏菌属(Prevotella)、假单胞菌属(Pseudomonas)、Pseudarthrobacter;而NP组的为Succinivibrio、Desulfobactrium、柔嫩梭菌属(Faecalibacterium)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、Acinetobacter、毛螺璇菌属(Lachnospira)、Wolbachia等菌群。说明PE与NP组患者肠道菌群存在差异。3.PICRUSt微生物功能预测分析结果显示,在NP组与PE组的比较中,level 2水平上共有41个代谢通路具有组间差异(P<0.05)。其中细胞运动、外源生物降解与代谢、心血管疾病、脂质代谢、内分泌系统、循环系统、氨基酸代谢、细胞生长与死亡等代谢通路多在PE组中富集。提示PE组中与代谢途径相关的细菌更丰富。4.最后,采用ELISA法对NP组与PE组患者血清中炎症因子水平进行分析,与NP组相比,PE组患者血清中IL-6、IL-8、IL-1β的含量显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05);此外,IL-5含量较NP组增加,但无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究我们发现PE患者肠道菌群的微生物丰富性及多样性显著降低,其中致病菌Clostridium、Fusobacterium、Fournierella、Prevotella的丰度明显升高,而有益菌Faecalibacterium、Bifidobacterium的丰度明显降低;此外,PE患者血清中促炎因子,如IL-8、IL-1β、IL-6显著升高。这些结果提示PE患者肠道菌群失调可能引起机体外周血促炎因子的上升,从而加重PE机体的炎症反应,有望为PE的诊疗、改善预后提供理论基础。
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