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目的:采用尾静脉注射构建阿霉素肾病BALB/c小鼠模型,观察肾病一号方对阿霉素肾病BALB/c小鼠的生化指标、病理形态学和对Angptl3及足细胞相关分子Nephrin、Podocin、CD2AP表达的影响,研究肾病一号方对阿霉素肾病小鼠足细胞的保护作用。方法:1.建模及干预:取8周龄BALB/c小鼠,20-25g,雄性,随机分为5组,每组10只,分别为盐水对照组(C)、模型组(M)、中药干预组(M+Z)、激素干预组(M+S)、中西医结合组(M+Z+S);其中M组、M+Z组、M+S组、M+Z+S组用阿霉素(10mg/kg)一次性尾静脉注射构建肾病综合征模型,C组注射等剂量生理盐水作为对照,中药肾病一号方煎剂剂量为(26.1g/(kg.d)),激素泼尼松剂量为(18mg/(kg.d)),对相应的组别进行灌胃,从造模后第一天开始,每天1次,连续28天。2.观察并记录小鼠的基本情况;并分别于造模第7天、14天、21天、28天用代谢笼收集24小时尿液,最后于第29天处死小鼠摘眼球取血,收集血清、尿液、肾组织标本。3.检测指标:(1)尿生化指标:尿蛋白/肌酐比值;血清生化指标:血清白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮;(2)肾脏病理形态:光镜及电镜下观察肾脏形态结构及足细胞超微结构;(3)检测Angptl3、Nephrin、Podocin及CD2AP分子的表达。结果:(1)尿生化指标(尿蛋白/肌酐)1)各组阿霉素造模后,第一周出现蛋白尿,模型组(2.13±0.25)与对照组(1.63±0.49)比较差异有统计学意义(P<0.05),至第四周末蛋白/肌酐比值达到最大值(2.54±0.39)且与同一时间点对照组(1.64±0.67)比较差异有统计学意义(P<0.05)。2)与模型组相比,第一周和第二周中药干预组的尿蛋白/肌酐比值降低,但差异无统计学意义(P>0.05),第三周(2.02±0.09)、第四周(2.06±0.21)尿蛋白/肌酐比值与模型组比较降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。3)激素干预组尿蛋白/肌酐比值第一周(1.69±0.38)与模型组(2.13±0.25)比较降低,且差异有统计学意义(P<0.05);第二周(1.87±0.12)与模型组(2.19±0.33)比较尿蛋白/肌酐比值降低,且差异有统计学意义(P<0.05);第三周(1.97±0.04)与模型组(2.30±0.28)比较尿蛋白/肌酐比值降低,且差异有统计学意义(P<0.05);第四周(2.04±0.07)与模型组(2.54±0.39)比较尿蛋白/肌酐比值降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。4)中西医结合组尿蛋白/肌酐比值第一周(1.64±0.23)与模型组(2.13±0.25)比较降低,且差异有统计学意义(P<0.05);第二周(1.82±0.06)与模型组(2.19±0.33)比较尿蛋白/肌酐比值降低,且差异有统计学意义(P<0.05);第三周(1.86±0.21)与模型组(2.30±0.28)比较尿蛋白/肌酐比值降低,且差异有显著统计学意义(P<0.01);第四周(1.93±0.09)与模型组(2.54±0.39)比较尿蛋白/肌酐比值降低,且差异有显著统计学意义(P<0.01)。(2)血清生化指标1)阿霉素造模4周后,与对照组小鼠(31.14±3.66)相比,模型组小鼠的血清白蛋白含量(g/l)(25.38±5.53)显著降低,且差异有统计学意义(P<0.05);中药干预组血清白蛋白水平(25.32±2.89)与模型组(25.38±5.53)相比差异无统计学意义(P>0.05);激素干预组血清白蛋白水平(31.53±4.12)高于模型组(25.38±5.53),且差异有统计学意义(P<0.05);中西医结合组血清白蛋白水平(32.68±4.38)高于模型组(25.38±5.53),且差异有显著统计学意义(P<0.01)。2)与对照组小鼠相比,模型组小鼠甘油三酯(mmol/l)(3.76±0.94)水平高于对照组(1.73±0.25),且差异有统计学意义(P<0.05);中药干预组(2.72±0.81)、激素干预组(2.34±0.59)、中西医结合组(1.84±0.68)甘油三酯水平均低于模型组(3.76±0.94),且差异均有统计学意义(P<0.05);中西医结合组较显著。3)与对照组小鼠相比,模型组小鼠总胆固醇(mmol/l)含量(6.42±1.39)高于对照组(2.84±0.44),且差异有统计学意义(P<0.05);激素干预组(3.23±0.44)、中西医结合组(3.02±0.37)与模型组比较总胆固醇降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。4)各组小鼠血肌酐和尿素氮水平均无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)肾脏组织病理形态变化造模4周后光镜下各组小鼠肾小球结构均无明显病理变化,电镜下模型组小鼠肾小球足突融合消失,中药干预组、激素干预组和中西医结合组均出现不同程度的缓解,其中以中西医结合组对阿霉素肾病小鼠肾小球足突融合程度缓解较明显。(4)Angptl3及足细胞相关蛋白的表达(各蛋白分子灰度值比较)1)Nephrin:与对照组(1.02±0.13)比较,模型组小鼠Nephrin(0.49±0.09)表达水平降低,且差异有统计学意义(P<0.05);中药干预组(0.84±0.26)、激素治疗组(0.80±0.33)、中西医结合组(0.99±0.26)与模型组小鼠(0.49±0.09)比较Nephrin表达水平均降低,且差异均有统计学意义(P<0.05);以中西医结合组Nephrin表达水平降低较为明显,且差异有显著统计学意义(P<0.01)。2)Podocin:与对照组(0.72±0.15)比较,模型组小鼠Podocin(0.44±0.12)表达水平降低,且差异有统计学意义(P<0.05);中药干预组(0.62±0.05)、激素治疗组(0.67±0.19)、中西医结合组(0.69±0.17)与模型组小鼠(0.44±0.12)比较Podocin表达水平均降低,且差异均有统计学意义(P<0.05);以中西医结合组Podocin表达水平降低较为明显,且差异有显著统计学意义(P<0.01)。3)CD2AP:与对照组(1.39±0.47)比较,模型组小鼠CD2AP(0.53±0.24)表达水平降低,且差异有统计学意义(P<0.05);中药干预组(1.03±0.20)、激素治疗组(1.17±0.55)、中西医结合组(1.36±0.46)与模型组小鼠(0.53±0.24)比较CD2AP表达水平均降低,且差异均有统计学意义(P<0.05);以中西医结合组CD2AP表达水平降低较为明显,且差异有显著统计学意义(P<0.01)。4)Angptl3:与对照组(0.04±0.02)比较,模型组小鼠Angptl3(0.18±0.05)表达水平升高,且差异有统计学意义(P<0.05);中药干预组(0.11±0.06)、激素干预组(0.10±0.07)、中西医结合组(0.09±0.03)与模型组小鼠(0.18±0.05)比较Angptl3表达水平均降低,且差异均有统计学意义(P<0.05);以中西医结合组Angptl3表达水平降低较为明显,且差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:肾病一号方可以减轻阿霉素肾病小鼠蛋白尿程度,升高血清白蛋白,降低血脂,减少足突融合,减轻足细胞受损程度,保护足细胞的作用可能与降低Angptl3及升高足细胞相关蛋白Nephrin、Podocin和CD2AP的表达有密切关系。