人类ASB11基因在肌细胞分化中的调控作用

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ASB11是含锚蛋白重复序列和细胞因子信号抑制物盒蛋白质家族(human ankyrin repeat and SOCS box containing protein family, ASB family)的新成员,该家族成员有两个功能结构域:N-端的锚蛋白重复结构序列和C-端的SOCS盒。已有研究表明,该家族成员广泛参与了细胞生长、组织发育、胰岛素信号途径、泛素化和蛋白的解体、骨骼肌膜蛋白的形成等生物学过程。我们克隆的ASB11基因其编码蛋白含有两个结构域,位于其N端的6个被称为ankyrin repeat的锚蛋白重复序列和位于其C端的一个被称为SOCS的细胞信号因子抑制结构域。通过序列比对和进化树分析比较表明,该基因是保守的ASB家族成员之一。该基因位于染色体Xp22.31上,由7个外显子构成。亚细胞定位显示ASB11蛋白在细胞质和细胞核表达。Northern blot显示ASB11包含2.9 kb和5.0kb两个转录本,并且两个转录本在心肌和骨骼肌特异性表达。提示该基因可能与心脏和肌肉组织的发育有关。半定量RT-PCR和Western blot实验证明,在诱导的C2C12稳定转染细胞的肌分化过程中,过表达ASB11基因,作为bHLH生肌调节因子-Myf5、MyoD、myogenin-mRNA水平和蛋白质水平是下调的;而干扰ASB11的表达,这些标志基因的mRNA水平和蛋白质水平是上调的。Myf5、MyoD、myogenin的表达是决定中胚层祖细胞分化为成肌细胞的关键步骤。免疫细胞荧光实验证明了过表达ASB11对C2C12骨骼肌细胞的分化具有抑制作用。荧光素酶活性报告系统结果证明ASB11在NIH3T3细胞中能够降低MCK和RTK启动子的活性。本研究主要围绕ASB11基因的克隆、组织表达、亚细胞定位、在肌分化中的生物学功能、可能的作用机制展开研究和探讨。
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