利用FcγR1的配体与广谱肿瘤抗原的化学生物学桥接制备乳腺癌肿瘤疫苗及其对小鼠乳腺癌的防治效应

来源 :南京师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:danielliang
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背景:乳腺癌(Breast cancer,BC)作为一种高度异质性的恶性肿瘤,它在全球的发病率和死亡率都位居前列。在乳腺癌免疫治疗中,肿瘤疫苗因耐受性好、毒性低、易于注射等优点而受到广泛关注。然而,现有肿瘤疫苗临床疗效并不佳,可能原因之一是尚无法做到将广谱肿瘤抗原通过特定激活性吞噬受体途径递送给抗原呈递细胞(Antigen presenting cell,APC)。本研究利用化学生物学方法将激活性吞噬受体FcγR1的配体与广谱肿瘤抗原连接制备新型乳腺癌肿瘤疫苗,并进一步验证其对小鼠乳腺癌的防治效应。方法:抗原抗体复合物疫苗的制备:首先,利用免疫荧光技术和流式细胞术分析非天然糖在4T1肿瘤细胞上的代谢掺入;其次,利用免疫荧光技术和免疫印迹技术鉴定叠氮化4T1肿瘤抗原的生物素化;最后,利用考马斯亮蓝染色技术和免疫共沉淀技术鉴定生物素化肿瘤抗原与抗生物素的小鼠Ig G1抗体(anti-Biotin m Ig G1 antibody)的交联。BLAB/c小鼠的预防性免疫:单一抗原抗体复合物疫苗免疫策略,疫苗联合Flt3L、G-CSF、雷西莫特(Resiquimod,R848)等免疫佐剂的综合性免疫策略,分析不同免疫策略对小鼠乳腺癌的防治效应。结果:非天然糖(Ac4Man NAz)代谢掺入4T1肿瘤细胞的最佳浓度和最佳时间分别是2 m M、16 h;生物素化肿瘤抗原与抗生物素抗体交联的最佳比例(w/w)是20/1。单一疫苗免疫策略对小鼠乳腺癌未表现出明显的防治效应。而综合性的免疫策略能够引发一定强度的抗肿瘤免疫应答,但是这种应答存在较大的个体差异性,R848处理能显著抑制肿瘤的生长。与单一疫苗免疫相比,综合性免疫能够延长乳腺癌小鼠的存活时间,尽管这种存活差异尚未达到显著水平。结论:本研究通过化学生物学手段实现了广谱肿瘤抗原与FcγR1配体的交联,在方法学上为研制新型肿瘤疫苗奠定了基础。从我们初步的动物实验结果来看,单一肿瘤疫苗作为防治肿瘤的手段,其效果有限。然而,肿瘤疫苗与细胞因子及其他免疫佐剂联合的综合性免疫治疗可能会产生较好的抗肿瘤效果。本研究所使用的肿瘤疫苗对实验动物所产生的抗肿瘤免疫应答情况需要做更深入的考察。
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