钛表面含镁纳米结构对成纤维细胞生物学行为的影响

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背景:种植体周围软组织封闭不仅依赖于上皮附着,更重要的是重建纤维结缔组织附着,以稳固地支撑上皮屏障从而预防种植体周围炎,维持种植义齿的长期成功率。基台是种植义齿的重要组成部分,其颈部表面主要与软组织接触,因此理想的基台颈部表面应能促进软组织与其形成稳定、牢固的基台-软组织结合。目前临床上所采用的基台颈部表面主要是光滑表面,但研究表明光滑表面不利于成纤维细胞黏附与增殖,所形成的胶原纤维与表面平行,附着强度低,易从基台表面分离;而相对于光滑表面,微粗糙表面更有利于结缔组织附着,同时多种金属阳离子可以调节细胞生物学行为,对细胞的黏附与增殖具有重要意义,然而钛表面含镁纳米结构对成纤维细胞的生物学行为影响缺乏深入研究。目的:本研究旨在通过碱热处理得到具有纳米结构的钛表面,并经离子交换技术在纳米结构上载入Mg2+,探究含镁纳米表面对成纤维细胞生物学行为的影响。方法:纯钛试件依次经逐级抛光、碱热、碱热+离子交换处理,分别得到三种不同的表面,即为光滑组(S)、碱热组(AH)、碱热-镁离子组(AH-Mg);使用扫描电子显微镜(SEM)观察试件表面形貌、原子力显微镜(AFM)检测其表面粗糙度、接触角测试仪(CAM)测试表面亲疏水性能、能谱仪(EDS)分析试件表面化学元素组成、电感耦合等离子体发射光谱(ICP-MS)测定镁离子的释放浓度。试件表面接种L929成纤维细胞,通过细胞黏附实验、细胞增殖实验、黏着斑实验、胶原排列及沉积实验综合评估三组表面对成纤维细胞生物学行为的影响。结果:1、AH组与AH-Mg组试件表面结构一致,均为海绵状纳米表面,孔径约80200nm,表面粗糙度Ra值为0.45μm,AH-Mg组试件表面成功引入Mg2+,增强了试件表面的亲水性能。2、对L929细胞早期黏附的促进作用:AH-Mg组>AH组>S组(P<0.05)。3、对L929细胞的增殖作用:AH-Mg组>AH组>S组(P<0.05)。4、24h黏着斑:AH-Mg组>AH组>S组(P<0.05),AH-Mg组与AH组较S组细胞铺展范围更大,有明显伪足伸出。5、胶原排列与沉积作用:14d时,S组胶原纤维平行于材料表面,AH组与AH-Mg组胶原更加密集且具有多向性(包括垂直材料表面);与S组相比,AH组与AH-Mg组表面胶原沉积量均增高(P<0.05)。AH-Mg组较AH组未增加胶原最终沉积量(P>0.05),但AH-Mg组表面可加快胶原生成速度。结论:1、碱热处理结合离子交换技术可以成功在钛表面构建海绵状含镁纳米结构(孔径:80200nm)。2、含镁纳米结构对成纤维细胞的黏附与增殖具有促进作用,且能够改变胶原纤维排列方向加速早期胶原形成速度。
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