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第一篇K562和HL-60细胞低密度脂蛋白胆固醇受体及HMG-CoA还原酶活性变化及意义目的:寻找白血病细胞和正常细胞之间脂质代谢的差异,进而利用这种差异进行靶向治疗,寻找抑制白血病细胞增殖但对正常细胞无损伤的有效方法。方法:参照孟凡青方法并加以改进,采用低浓度阿托伐他汀抑制细胞内源性胆固醇合成途径,提供外源性低密度脂蛋白胆固醇供细胞生长,应用MTT比色法检测细胞分裂生长抑制率,进而判断低密度脂蛋白受体活性。应用紫外分光光度法测定细胞3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶活性;采用MTT法观察HMG-CoA抑制剂阿托伐他汀对白血病细胞系K562、HL-60和正常细胞系HK-2细胞增殖作用的影响:将对数期生长的细胞按每孔100μl接种于96孔培养板中,阿托伐他汀用含10%胎牛血清的RPMI1640分别配成10,20,40,80,160μmol/L加入培养体系,每孔100μl,以不加药物而加含10%胎牛血清的RPMI1640 100μl及上述细胞100μl的培养体系为对照。结果:与正常细胞HK-2比较,白血病细胞K562、HL-60低密度脂蛋白胆固醇受体活性增高、HMG-CoA还原酶活性增高(p<0.05);阿托伐他汀以时间和剂量依赖性的方式抑制K562、HL-60细胞增殖,即随着阿托伐他汀处理浓度的加大、作用时间的延长,细胞存活率逐渐下降。阿托伐他汀对HK-2细胞增殖抑制作用与时间及剂量无关。结论:白血病细胞系K562、HL-60细胞低密度脂蛋白胆固醇受体和HMG-CoA还原酶活性较正常细胞HK-2增高;应用HMG-CoA还原酶抑制剂(阿托伐他汀)干扰细胞内源性胆固醇合成途径可以抑制白血病细胞系K562、HL-60细胞的增殖;MTT方法是一种测定细胞LDL受体活性的可靠、简便、安全的方法。第二篇急性白血病细胞低密度脂蛋白胆固醇受体及HMG-CoA还原酶活性变化及意义目的研究急性白血病患者骨髓细胞低密度脂蛋白胆固醇受体及HMG-CoA还原酶活性变化及意义。方法以20例非恶性血液病患者骨髓为对照,实验组分为初治组、缓解组、复发组、持续缓解组及未缓解组。检测了56例急性白血病患者化疗前后骨髓细胞低密度脂蛋白胆固醇受体及HMG-CoA还原酶活性;观察了HMG-CoA还原酶抑制剂—阿托法他汀(立普妥)对实验组及对照组细胞的增殖抑制作用。实验方法同第一章。结果与对照组比较,初治组、复发组及未缓解组急性白血病细胞低密度脂蛋白胆固醇受体活性增高、HMG-CoA还原酶活性增高(p<0.001),缓解组及持续缓解组其二者活性与对照组差别无统计学意义(p>0.05)。阿托法他汀(立普妥)以时间和剂量依赖性的方式抑制初治急性白血病患者、复发和未缓解患者骨髓细胞的增殖,但对于后两组患者的抑制率低于初治患者。阿托伐他对缓解组急性白血病患者骨髓细胞及对照骨髓细胞增殖抑制作用与时间及剂量无关。结论初治急性白血病患者低密度脂蛋白胆固醇受体及HMG-CoA还原酶活性明显高于对照组,完全缓解后恢复至接近对照组水平,复发后及未缓解时升高。检测低密度脂蛋白胆固醇受体及HMG-CoA还原酶活性对急性白血病的病情判断、预测复发、估计预后可能有一定意义。阿托伐他汀具有抑制急性白血病细胞增殖的作用,HMG-CoA还原酶抑制剂具有辅助治疗白血病的可能性。