目的:研究蠲痹汤及其有效成分羌活醇通过抑制淋巴管内皮细胞炎症,促进膝关节周围淋巴回流功能的疗效机制;探究淋巴系统为蠲痹汤及羌活醇治疗KOA的作用靶点。方法:1.蠲痹汤调控小鼠膝关节淋巴回流治疗KOA的体内研究10周龄雄性C57BL/6小鼠,适应性饲养一周后,右膝关节DMM（Destabilization medial meniscus）手术建立KOA模型,左膝接受假手术作为对照。将小鼠随机分为三组:蠲痹汤组,莫比可组,PBS组,20只/组。术后4W、8W活体检测后取材。采用近红外吲哚菁绿（NIR-ICG）淋巴成像系统检测关节淋巴回流功能;ABOG染色法进行形态学染色,检测关节结构、软骨面积、滑膜面积,滑膜炎性细胞数量;采用OARSI score来评估关节退变程度;IHC检测膝关节关节软骨Col Ⅱ和MMP13表达,评估膝关节关节软骨退变程度。2.蠲痹汤冻干粉干预淋巴管内皮细胞NF-κB信号通路炎症激活的体外研究使用IL-1β（10ng/ml）刺激淋巴管内皮细胞。在炎症刺激下,LEC合成释放大量炎性因子。使用蠲痹汤冻干粉干预后,利用PCR和Western blot,观察蠲痹汤对IL-1β、诱导性一氧化氮合酶、TNF-α等mRNA以及NF-κappa B通路相关蛋白表达的影响,并做细胞毒性实验检测药物安全性。3.羌活醇调控小鼠膝关节淋巴回流治疗KOA的体内研究10周龄雄性C57BL/6小鼠,右膝关节DMM手术诱导KOA模型,左膝假手术作为对照。将小鼠随机分为三组:羌活醇组,莫比可组,PBS组,16只/组。术后6W、12W活体检测后取材。采用VEVO2100小动物超声成像系统检测小鼠膝关节腔;采用NIR-ICG淋巴成像系统检测关节淋巴回流功能;ABOG染色法进行形态学染色,检测关节结构、关节软骨面积、滑膜面积;采用OARSI score来评估关节退变程度;IHC检测膝关节软骨Col Ⅱ、Col Ⅹ和MMP13的表达,以此评估膝关节关节软骨退变程度。4.羌活醇干预淋巴管内皮细胞NF-κB信号通路炎症激活的体外研究使用IL-1β（10ng/ml）处理LEC,在IL-1β刺激下,LEC合成释放大量炎性因子,使用羌活醇干预后,利用PCR及Western blot,观察其对IL-1β、iNOS、TNF-α等mRNA以及NF-κB通路蛋白的影响,并做细胞毒性实验检测药物安全性。结果:1.蠲痹汤促进小鼠膝关节淋巴回流,延缓KOA进程NIR-ICG结果显示,蠲痹汤促进小鼠膝关节ICG的清除率,明显改善了淋巴管回流功能。ABOG染色显示,蠲痹汤组关节软骨完整性、软骨面积、OARSI Scores、滑膜面积、滑膜区域细胞数量明显优于PBS组。与PBS组比较,蠲痹汤组关节软骨中Col Ⅱ表达明显增多,MMP13表达减少。2.蠲痹汤冻干粉抑制LEC中NF-κB通路炎症激活,抑制其相关蛋白表达PCR显示,IL-1β处理LEC后,其合成并释放IL-1β、iNOS、TNF-α等相关炎症因子,蠲痹汤冻干粉干预后,显著抑制了 LEC炎性因子的表达;Western blot结果显示,蠲痹汤冻干粉抑制了 P65、IκBα蛋白的磷酸化,抑制了 iNOS、TNF-α等蛋白的表达。3.羌活醇促进小鼠膝关节淋巴回流,延缓KOA进程膝关节超声成像结果显示,羌活醇组小鼠膝关节关节积液量明显减少;NIR-ICG结果显示,羌活醇促进小鼠膝关节ICG的清除率,明显改善了淋巴管回流功能。ABOG染色显示,羌活醇组关节软骨完整性、软骨面积、OARSI Scores、滑膜面积、滑膜区域细胞数量明显优于PBS组。与PBS组比较,羌活醇组关节软骨中Col Ⅱ表达明显增多,Col X、MMP13表达减少。4.羌活醇抑制LEC中NF-κB通路炎症激活,抑制其相关蛋白表达PCR结果显示,IL-1β处理LEC后,LEC大量合成IL-1β、iNOS、TNF-α等炎性因子,羌活醇干预后,显著抑制了 LEC炎性因子的表达;Western blot结果显示,羌活醇抑制了 P65、IκBα蛋白的磷酸化,抑制了 iNOS、TNF-α等蛋白的表达。结论:1.蠲痹汤及其有效成分羌活醇能够抑制IL-1β诱导的LEC中NF-κB通路激活,减少IL-1β,iNOS和TNF-α炎症产物生成,从而减轻KOA炎症反应。2.蠲痹汤及其有效成分羌活醇通过调控淋巴循环系统,促进KOA小鼠膝关节淋巴回流,减轻局部炎症产物淤积,减轻关节软骨损伤,从而延缓KOA进程。