【摘 要】
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目的:观察子宫内膜异位症（EMs）大鼠血清及腹腔液中神经生长因子（NGF）水平变化,以及异位内膜NGF及其受体酪氨酸激酶受体A（Trk A）和神经营养因子受体p75（p75NTR）的基因及蛋白表达,探讨盆痛灵对子宫内膜异位症大鼠的镇痛作用机理。方法:设假手术组大鼠10只（仅切除单侧结扎段子宫）,采用自体内膜移植法建立SD大鼠EMs模型,取造模成功的大鼠随机分为模型组、盆痛灵低、中、高剂量组和消炎痛
【基金项目】
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国家自然科学基金委员会面上项目（课题编号:81674009）；
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目的:观察子宫内膜异位症（EMs）大鼠血清及腹腔液中神经生长因子（NGF）水平变化,以及异位内膜NGF及其受体酪氨酸激酶受体A（Trk A）和神经营养因子受体p75（p75NTR）的基因及蛋白表达,探讨盆痛灵对子宫内膜异位症大鼠的镇痛作用机理。方法:设假手术组大鼠10只（仅切除单侧结扎段子宫）,采用自体内膜移植法建立SD大鼠EMs模型,取造模成功的大鼠随机分为模型组、盆痛灵低、中、高剂量组和消炎痛组,每组10只。盆痛灵低、中、高剂量组大鼠分别给予10.2、20.4、40.8g·kg-1·d-1盆痛灵方水煎液,消炎痛组大鼠给予3mg·kg-1·d-1消炎痛混悬液,各组均采用直肠给药方式,每天1次,连续4周。模型组和假手术组给予等体积0.9%Na Cl溶液。采用Von Frey2390电子测痛仪测量大鼠机械压力痛阈,观察其痛阈变化。末次给药后,采集血清及腹腔液,ELISA检测EMs大鼠血清及腹腔液中NGF的浓度,并分析NGF浓度与痛阈变化的关系。采集各组子宫内膜组织,PCR检测各组大鼠异位内膜NGF、p75NTR、Trk A的mRNA表达,免疫组化法和Western blot检测异位内膜NGF、p75NTR、Trk A蛋白表达。结果:1.ELISA结果显示,在血清及腹腔液中,模型组的NGF水平较假手术组升高（P＜0.001）;与模型组相比,消炎痛组和盆痛灵中、高剂量组NGF水平降低（P＜0.05）;与消炎痛组比较,盆痛灵低、中剂量组中的NGF水平较高（P＜0.01）。在盆痛灵三组中,与盆痛灵低剂量组相比,中、高剂量组的血清及腹腔液中NGF水平降低（P＜0.05）;与盆痛灵中剂量组相比,高剂量组腹腔液中NGF水平降低（P＜0.01）。2.相关性分析结果显示,EMs各组机械痛阈值分别与腹腔液NGF水平成负相关,而假手术组大鼠的机械痛阈值与腹腔液NGF水平无相关关系。各组大鼠的机械痛阈值与血清中NGF水平无相关关系,各组大鼠的腹腔液与血清中NGF水平无相关关系。3.免疫组化结果显示,NGF及其受体p75NTR、Trk A主要在异位内膜的腺上皮细胞与间质细胞胞浆表达,在胞核仅少量表达。与模型组相比,消炎痛组与盆痛灵中、高剂量组中的NGF及其受体阳性表达均减弱,盆痛灵低剂量组不明显。与假手术组比较,模型组中NGF及其受体p75NTR、Trk A相对蛋白表达均升高（P＜0.01）;与模型组相比,消炎痛组和盆痛灵高剂量组可明显降低NGF、p75NTR、Trk A表达（P＜0.01）,低、中剂量组仅能降低NGF表达（P＜0.01）;与消炎痛组相比,盆痛灵低、中剂量组p75NTR、Trk A表达较高（P＜0.01）。在盆痛灵三组中,分别与低、中剂量组比较,盆痛灵高剂量组均能明显降低p75NTR、Trk A的表达（P＜0.05）。4.PCR结果显示,模型组大鼠内膜组织NGF、p75NTR、Trk A的mRNA表达较假手术组比显著升高（P＜0.01）;与模型组相比,消炎痛组和盆痛灵中、高剂量组中NGF、Trk A的mRNA表达降低（P＜0.05）,消炎痛组和盆痛灵高剂量组p75NTR的mRNA表达明显降低（P＜0.01）;与消炎痛组比较,盆痛灵低、中剂量组中NGF及p75NTR的mRNA表达均较高（P＜0.05）,盆痛灵低剂量组中Trk A的mRNA表达较高（P＜0.01）。在盆痛灵三组中,与盆痛灵低剂量组相比,高剂量组大鼠内膜组织NGF、p75NTR、Trk A的mRNA表达均显著降低（P＜0.01）,中剂量组中Trk A的mRNA表达亦降低（P＜0.05）;与盆痛灵中剂量组相比,高剂量组p75NTR的mRNA表达明显降低（P＜0.05）。5.Western blot结果显示,模型组大鼠内膜组织NGF、p75NTR、Trk A蛋白表达水平较假手术组显著升高（P＜0.01）;与模型组相比,消炎痛组和盆痛灵低、中、高剂量组中的NGF、p75NTR、Trk A蛋白表达均明显降低（P＜0.01）;与消炎痛组比较,盆痛灵组中NGF、p75NTR、Trk A的蛋白表达均较高（P＜0.01）。与盆痛灵低剂量组相比,中、高剂量组的异位子宫内膜组织NGF、p75NTR、Trk A蛋白表达均显著降低（P＜0.01）;与盆痛灵中剂量组相比,高剂量组NGF、p75NTR、Trk A蛋白表达亦显著降低（P＜0.01）。结论:盆痛灵方可能通过抑制异位内膜中NGF与其受体p75NTR、Trk A结合,降低异位内膜组织周围腹腔液和血清中NGF水平,对子宫内膜异位症疼痛起调控作用。
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