白蚁球菌的5L发酵罐验证发酵和菌丝粉对动物血脂的影响

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白蚁球菌Fibularhizoctonia sp.是发现于散白蚁巢中的共生真菌。本论文以白蚁球菌为研究对象,以腺苷为指标对白蚁球菌摇瓶发酵的装液量进行了优化并进行7天周期实验选出最佳的发酵时间,在此基础上首次使用5 L发酵罐对白蚁球菌进行了发酵罐发酵实验,并对所得菌丝粉进行动物降血脂功能研究,为白蚁球菌进行中试放大提供依据,对白蚁球菌菌丝粉相关产品的开发利用奠定基础。主要研究结果如下:(1)白蚁球菌药瓶发酵条件优化实验,以腺苷为指标对白蚁球菌的摇瓶装液量进行优化,在此基础上进行了7天周期实验,对7天内白蚁球菌菌丝体干重、腺苷含量、p H值及发酵液残糖浓度进行检测,确认白蚁球菌产腺苷的最佳时间,对白蚁球菌摇瓶发酵种子液以及腺苷的提取时间进行确认。实验结果显示,白蚁球菌摇瓶发酵装液量为15%,在发酵的第3天白蚁球菌腺苷含量达到最大值,最高可达4.45 mg/g;以发酵液作为白蚁球菌发酵种子液更有利于白蚁球菌合成腺苷,测得腺苷含量为5.17 mg/g;白蚁球菌使用超声水提最佳提取时间为3h。(2)白蚁球菌5L发酵罐实验是在摇瓶发酵基础上对白蚁球菌进行5L发酵罐放大实验。采用单因素实验对搅拌速度、通气量、接种量进行初步摸索。实验结果显示,可使用搅拌速度为100 r/m、通气量为3 l/m、1瓶种子液进行白蚁球菌5L发酵罐发酵。(3)对白蚁球菌菌丝粉进行重金属离子及黄曲霉毒素B1检测结果显示:菌丝粉中铅含量为0.11 mg/kg、砷含量小于0.085 mg/kg、汞含量为0.047 mg/kg、镉含量为0.017 mg/kg、黄曲霉毒素B1小于0.03μg/kg。(4)以SD大鼠为实验动物使用高脂饲料构建SD大鼠高脂模型,将白蚁球菌制备混悬液设1.00 g/kg.Bw、0.50 g/kg.B·w、0.25 g/kg.Bw作为高、中、低三个剂量组进行灌胃30天后眼底静脉采血测定血清中的TC、TG、LDL-C、HDL-C,结果如下,白蚁球菌菌丝粉会使模型大鼠血清甘油三酯TG降低,但与对照组比较未达到显著性差异。综上所述,本研究使白蚁球菌摇瓶发酵的腺苷产量提高至5.17 mg/g,经过白蚁球菌5L发酵罐实验腺苷产量最高可达5.79 mg/g,并且菌丝粉中的重金属元素、黄曲霉毒素符合食用菌卫生学要求,为白蚁球菌的工业化生产奠定了基础。
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