目的:人巨细胞病毒(HCMV)感染在免疫缺损患者中有着很高的发病率和死亡率,目前临床上仍没有彻底控制HCMV感染的手段。表达特异性T细胞受体(TCR)的T细胞输注治疗被认为是非常有前景的防治HCMV感染的方法。本研究的目的是通过将HCMV特异性TCR基因转染到免疫健全和免疫缺陷者的外周血单个核细胞(PBMCs)中探究HCMV特异性TCR-T细胞的免疫应答机制,为以后HCMV特异性T细胞的应用奠定基础。方法:分离HCMV～IgG阳性健康人的PBMCs、造血干细胞移植(HSCT)患者术后3个月的PBMCs和移植术后6个月的PBMCs。以HCMV特异性TCR序列“CASSSANYGYFT”为研究对象,通过构建慢病毒表达载体,将该特异性TCR基因分别转染到上述PBMCs中,获得表达特异性TCR的T细胞(TCR-V组);同时将每份PBMCs用携带无关TCR基因的慢病毒载体进行感染,获得表达无关TCR的T细胞(TCRm-V组)以作对照。利用基于流式细胞术的五聚体染色和酶联免疫斑点实验评价转基因T细胞的数目和其对HCMV抗原肽的免疫应答能力。结果:健康人的PBMCs经特异性TCR基因转染后,能够与HCMV pp65495-503抗原肽五聚体结合的CD8阳性T细胞(CD8+/PEN+T细胞)数目明显增多,具有特异性分泌IFN-y的细胞数目也显著增加(与TCRm-V组相比,p<0.001);移植后3个月的PBMCs经特异性TCR基因转染后,CD8+/PEN+T细胞数和特异性分泌IFN-γ的细胞数目均显著增加(TCRm-V组相比,p<0.05);移植后6个月的PBMCs经特异性TCR基因转染后,CD8+/PEN+T细胞数明显增加,但特异性分泌IFN-y的细胞数目则无显著性变化(与TCRm-V组相比,p>0.05)。结论:特异性TCR-T细胞可能用于防治HSCT受者术后HCMV感染;特异性TCR-T细胞在HSCT术后急性排异期内对HCMV感染的免疫应答效果可能优于后期随访。