【摘 要】
：
肝癌是我国乃至全球发病率较高的恶性肿瘤,而目前治疗肝癌的手段仍然以化疗为主。已上市的化疗药虽种类繁多,但是普遍存在毒副作用大,选择性低,无靶向性等特点,因此纳米靶向给药系统也逐渐成为了研究的热点。这种载药系统相比于传统药物能够使药物在特定部位释放,降低药物对正常组织的毒副作用。因此本课题设计了一种以肝癌细胞表面特异性配体甘草次酸（GA）和具有良好细胞膜穿透性的细胞穿膜肽（TAT）共同修饰包载抗肿瘤
论文部分内容阅读
肝癌是我国乃至全球发病率较高的恶性肿瘤,而目前治疗肝癌的手段仍然以化疗为主。已上市的化疗药虽种类繁多,但是普遍存在毒副作用大,选择性低,无靶向性等特点,因此纳米靶向给药系统也逐渐成为了研究的热点。这种载药系统相比于传统药物能够使药物在特定部位释放,降低药物对正常组织的毒副作用。因此本课题设计了一种以肝癌细胞表面特异性配体甘草次酸（GA）和具有良好细胞膜穿透性的细胞穿膜肽（TAT）共同修饰包载抗肿瘤药平阳霉素（PYM）的肝靶向递药系统,以期实现抗肿瘤药的靶向传递并且有效转运至细胞内发挥药效提高抗肿瘤效率的作用。主要研究内容如下:（1）首先是合成GA-GABA-Chol。方法是将Chol和N-boc-γ-氨基丁酸通过酯化反应合成boc-GABA-Chol,boc-GABA-Chol经过脱boc反应得到GABA-Chol,最后将其与GA通过酰胺化反应得到GA-GABA-Chol。该合成方法反应时间短,操作简单,得到的产物纯度较高,适合大批量生产。（2）建立PYM的体外分析方法,并以载药量和包封率为指标对脂质体的卵磷脂和胆固醇的用量比、卵磷脂与药物的用量比、硫酸铵浓度、透析时间、孵化温度、剪切时间以及探头超声时间进行考察,最终确定最佳制备条件为:卵磷脂和胆固醇用量比5:1、卵磷脂与药物的用量比为20:1、硫酸铵浓度为150m M、透析时间为12 h、孵化温度为45℃、剪切时间为10 min、探头超声时间为30 min。（3）对甘草次酸和细胞穿膜肽双重修饰的平阳霉素脂质体（GA-TAT-PYM-L）进行药剂学评价,包括粒径、Zeta电位、外观形态、载药量、包封率、稳定性以及溶血率等进行考察。结果显示,本实验制备的脂质体呈现出的圆球状,少量为不规则形状,通过测量粒径为89.16 nm,Zeta电位为-17.1m V,PDI值为0.24。通过计算得到GA-TAT-PYM-L的包封率为67.6%,载药量为2.56%。并通过UV-Vis和XRD验证了PYM被成功包载在脂质体内部形成复合物。同时对GA-TAT-PYM-L冷冻干燥后的冻干粉制剂稳定性进行了考察,结果显示冻干粉呈现出质地均匀的淡黄色疏松状态,复溶分散性良好,且粒径和包封率无明显变化。对GA-TAT-PYM-L冻干粉28 d的稳定性进行考察,结果显示GA-TAT-PYM-L的粒径28 d内均小于100 nm,并且包封率也没有发生显著变化,稳定性良好。溶血实验结果显示,溶血率均小于5%,因此GA-TAT-PYM-L可用于静脉注射。（4）在此基础上我们对GA-TAT-PM-L体外抗肿瘤作用进行了研究。通过MTT实验考察PYM、空白脂质体GA-TAT-L、GA-TAT-PM-L对肝癌细胞（Hep G2）抑制作用,同时,通过AO/EB染色实验研究了PYM、GA-TAT-L、GA-TAT-PM-L对肝癌细胞（Hep G2）的形态学影响。结果表明,空白脂质体GA-TAT-L对Hep G2细胞几乎无抑制作用,而PYM和GA-TAT-PM-L对Hep G2抑制率呈现出一定程度的浓度依赖作用,并且GA-TAT-PM-L组相比于PYM组在相同浓度下对Hep G2细胞抑制作用更强。并且AO/EB染色实验也显示了GA-TAT-PYM-L相比于PYM具有更强的促Hep G2细胞凋亡的作用。（5）最后我们对GA-TAT-PYM-L在小鼠体内药代动力学和组织分布情况进行了研究。结果显示,通过尾静脉注射给予相同药物剂量的PYM和GA-TAT-PYM-L,GA-TAT-PYM-L组相比于PYM组能够明显延长药物在小鼠体内的作用时间,表现出一定的缓释作用,提高了药物的生物利用度。组织分布结果显示GA-TAT-PYM-L组在5min后各个监测时间段在肝脏中的PYM浓度明显高于其他组织,说明GA-TAT-PYM-L具有一定的肝主动靶向性。
其他文献
＜正＞浙江地区杨梅种植面积、品质和产量均居当地经济作物首列，是能够促进乡村振兴的经济果树。杨梅生长具有喜阴耐潮湿、惧高温烈日曝晒的特点，适宜生长温度为15～25℃。其售价具有极强的时令特点，采摘前后相差20天，售价可有2倍至数倍的差别。此外杨梅成熟季节雨水多会导致落果严重、品质变差。1大棚栽培传统温控方法杨梅采用大棚栽培可以克服外部环境气温骤变的缺点，起到相对恒温的效果。大棚栽培同时可以起到避雨效
在世界范围内,肺癌是与癌症相关的死亡的最常见原因。酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）因具有选择性高、副作用低的优势被广泛用于非小细胞肺癌（NSCLC）的治疗。但随着用药的进行,患者会产生耐药性,例如在第一代EGFR-TKIs抑制剂被晚期患者使用后,产生了T790M突变,这是NSCLC患者耐药突变中最为常见的类型。第二代EGFR-TKIs对L858R/T790M突变的EGFR有较好的抑制作用,但
β-淀粉样蛋白（Amyloidβ-protein,Aβ）通过脑部多种生理途径产生神经毒性,是脑部生理病变的重大成因,其异常累积是诱导产生阿尔兹海默症（Alzheimer’s disease,AD）最重要的病因之一。姜黄素及其衍生物的光学和电学性质良好,因为其具有高度π-电子离域和对称结构,并且对Aβ肽聚集体有靶向相互作用,对人体无毒副作用,以此合成的荧光探针可用于检测β-淀粉样蛋白。近年来近红外荧
邓小平“两制关系”理论是指邓小平同志在领导中国人民进行社会主义现代化建设的过程中,在深入分析世情国情,充分考虑历史和现实因素的基础上,从理论和实践两个方面总结出的关于“两制关系”的一系列科学理论。本文将以邓小平“两制关系”理论为研究对象,通过具体分析这一理论的产生条件,梳理其形成过程,研究其主要内容,探讨其在实践中的运用,从而揭示这一理论的历史意义和当代价值。本文除绪论和结语外,共分为五部分:第一
＜正＞广东农垦织篢农场有限公司隶属广东农垦阳江垦区,现有土地总面积6.32万亩,拥有2家直属单位和5个生产作业区。近年来,织篢农场公司贯彻绿色发展理念,结合自身土地资源优势和现有产业发展情况,探索出“光伏发电+农业项目”的经营模式,通过在光伏板下养殖黑山羊、种植经济作物,极大提高了土地利用率,每年增收近千万元,实现由单一产业到多产业齐头并进,经营效益创历史新高。
HGF是c-Met的唯一配体,是间充质细胞在发育过程中产生和分泌的旁分泌信号分子。HGF与其受体c-Met的结合诱导了几种复杂的信号通路,这些通路导致细胞增殖,存活,运动,诱导细胞极性,分散,血管生成和侵袭。c-Met过度表达可能是由于转录激活,基因扩增或缺氧引起的,并与原发肿瘤的转移和患者预后不良有关,因此,c-Met成为抗癌药物研发的重要靶标。本文基于TypeⅡ型c-Met激酶抑制剂的结构特点
随着世界局势的变化和政党力量的增强,党际交往成为国家总体外交的重要组成部分。新时代以来,以习近平同志为核心的党中央将中国共产党党际交往理论和发展局面推向了新的高度,对丰富马列主义党际交往思想和促进中华民族伟大复兴中国梦实现、世界社会主义运动发展具有重要的意义。本文对新时代以来中国共产党党际交往的理论和实践进行了系统的梳理,全文由绪论、新时代中国共产党党际交往的相关概念及背景、新时代中国共产党党际交
＜正＞本文从数字孪生技术在文化遗产领域的应用现状入手，通过对数字孪生多元化数据构建研究，关键技术突破和数据应用前景等可行性的挖掘，探索数字孪生多元化数据构建对于大型综合性博物馆的发展方向。数字孪生是以数字化的方式建立物理实体的多维、多时空尺度、多学科、多物理的动态虚拟模型，来仿真和刻画物理实体在真实环境中的属性、行为、规则等。简单来说就是在虚拟空间中构建一个物理实体的数字化镜像[1]。数字孪生能够
实验采用工业级高纯Mg（OH）2为原料,通过酸溶、除杂、氟化步骤成功制备了纯度在99%以上的高纯度Mg F2。其中,HNO3溶解能够对Mg（OH）2原料进行难溶除杂,随后通过草酸-双氧水法除去大部分金属离子杂质,最后与分析纯NH4F制备高纯度Mg F2。实验结果表明,在25℃氟镁比为2∶1的条件下,制备得到的Mg F2纯度最高,其中杂质离子含量均符合MF-2 Mg F2对于杂质有色金属离子含量的国