在世界范围内,肺癌是与癌症相关的死亡的最常见原因。酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）因具有选择性高、副作用低的优势被广泛用于非小细胞肺癌（NSCLC）的治疗。但随着用药的进行,患者会产生耐药性,例如在第一代EGFR-TKIs抑制剂被晚期患者使用后,产生了T790M突变,这是NSCLC患者耐药突变中最为常见的类型。第二代EGFR-TKIs对L858R/T790M突变的EGFR有较好的抑制作用,但对野生型EGFR也会产生抑制作用,存在着安全性问题。目前已开发出几种具有EGFR突变选择性和野生型（WT）功能的第三代EGFR-TKIs,以治疗这些患有T790M获得性耐药突变的患者,奥西替尼（AZD9291）则是第三代EGFR-TKIs代表药物之一。但接受第三代EGFR-TKIs治疗的患者仍会产生获得性耐药,并且已鉴定出多种机制,其中最常见的是第20外显子的C797S突变。本文以AZD9291为先导化合物,对其构效关系进行研究,通过增加新的氢键增强与突变后EGFR的结合能力的策略来进行药物分子设计,在原嘧啶部位引入新的含氮基团,形成以吡啶并[2,3-d]嘧啶为母核的结构,并对其丙烯酰胺和脂肪胺部分进行结构改造,尝试增加新的氢键和范德华力作用,共设计并合成24个未经文献报道的化合物,并通过MS、~1H NMR对化合物进行结构确证。本文对合成的24个化合物进行EGFR激酶测试实验以及体外抗肿瘤活性实验。激酶实验测试结果显示,化合物Z-3对EGFRL858R/T790M表现出较好的抑制效果,化合物Z-16对于EGFRWT和EGFRL858R/T790M激酶表现出一定的抑制活性,对于EGFRL858R/T790M/C797S激酶的抑制活性要优于对照药AZD9291。体外抗肿瘤活性实验以AZD9291为阳性对照药,以野生型肺癌细胞（A549）和人耐药肺癌细胞（H1975）为测试细胞株,采用MTT法进行测试。结果显示:化合物Z-3、Z-9、Z-16、Z-18对H1975细胞表现出较好的抑制活性,其中化合物Z-16的活性优于AZD9291。软琼脂克隆形成实验结果显示化合物Z-16集落数量较少,随着浓度的增大集落形成率越低,对肿瘤细胞的集落形成的抑制作用越强,呈浓度依赖,且其抑制作用优于阳性对照药AZD9291。本文以化合物Z-16为优选化合物,以A549细胞株和H1975细胞株为研究对象,对其作用机制进行进一步的研究。AO-EB染色实验表明化合物Z-16诱导细胞凋亡的能力随着浓度的升高,细胞凋亡数量增加,呈现浓度依赖。运用Autodock对化合物Z-16与EGFRL858R/T790M/C797S蛋白（PDB ID code:6S89）的对接方式进行模拟,结果显示化合物Z-16嘧啶环上的N1与Met793形成氢键作用,氨甲基嘧啶上的N与Ser797形成2个氢键作用,侧链脂肪胺与Asp800形成氢键作用。以上所有实验结果表明该类结构的化合物具有进一步的研究价值,为新型酪氨酸激酶抑制剂的深入研究奠定了基础。