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背景:RB1基因是最早被发现的抑癌基因之一,与多种肿瘤存在相关性。研究提示RB1基因失活可促进前列腺癌的发生、发展和转移,本课题组回顾性临床研究也显示RB1基因表达产物p RB蛋白水平高低与前列腺癌患者至CRPC时间之间存在相关性。但RB1基因表达水平对激素敏感前列腺癌细胞系生物学行为的影响及其在不同内分泌药物干预下细胞功能的变化少有报道。目的:本研究旨在探讨RB1基因表达产物p RB与初始接受内分泌治疗的晚期前列腺癌患者OS之间的相关性,并进一步通过基础实验探讨RB1基因表达对前列腺癌细胞系增殖(生存率)、迁移(划痕愈合率)、凋亡等生物学行为的影响,同时对阿比特龙(AIB)、比卡鲁胺(BIC)不同药物干预下RB1基因表达状态不同的前列腺癌细胞系增殖、迁移和凋亡情况进行研究,以探索RB1基因状态是否可以做为预后及内分泌治疗疗效的预测指标。方法:1.完成本课题组前期研究中入组患者的随访工作并获得OS。入组标准为2005年1月至2016年9月就诊于大连医科大学附属第二医院,初始为激素敏感型并最终进展为CRPC的50例IV期前列腺癌患者。随访截止时间为2019年11月或患者死亡,按之前免疫组化结果区分p RB高/低表达,通过统计学分析明确p RB蛋白水平与OS之间的相关性。2.应用实时定量聚合酶链反应(Real time quantity polymerase chain reaction,RT-PCR)及蛋白免疫印记法(Western blot)检测人前列腺癌LNCa P、PC-3、DU-145细胞系和永生化前列腺上皮RWPE-1细胞系RB1 m RNA及蛋白表达水平以筛选RB1高表达的前列腺癌细胞系;针对RB1基因的特异性构建3种小干扰RNA(siRNA:siRB-1、2和3),转染前列腺癌细胞系以敲降RB1基因,获得RB1低表达的前列腺癌细胞系;采用细胞增殖实验、划痕实验和流式细胞技术分析RB1基因敲降后对前列腺癌细胞系增殖、迁移和凋亡等生物学行为(分别以细胞生存率、划痕愈合率、凋亡率表示)的影响;同时检测敲降RB1后前列腺癌细胞系对内分泌药物(阿比特龙、比卡鲁胺)的敏感性。结果:1.对入组的50例患者进行统计学分析,结果发现p RB低表达组中位OS较p RB高表达组中位OS显著延长(51.0个月VS 19.0个月),差异有统计学意义(P<0.05)。2.经siRNA转染敲降RB1基因表达后,si-RB组较si-NC组前列腺癌LNCa P细胞系的增殖、迁移能力增强,细胞凋亡减少(P<0.05)。3.与si-NC组相比,si-RB组经不同药物干预后细胞增殖能力增强,细胞凋亡减少,差异有统计学意义(P<0.05);与未给药组相比,si-NC组及si-RB组经药物干预后细胞增殖、迁移能力减弱,细胞凋亡增加,差异同样有统计学意义(P<0.05);但si-NC组及si-RB组不同药物干预组间细胞增殖、迁移能力及凋亡未见明显变化(P>0.05)。结论:1.p RB低表达组患者的中位OS较高表达组显著延长,p RB可能成为晚期前列腺癌OS的预后因素。2.经siRNA敲降RB1基因的LNCa P细胞系增殖、迁移能力增强,凋亡减少;提示RB1基因表达状态可影响LNCa P细胞系功能。3.下调RB1基因表达水平,导致ABI、BIC对激素敏感型前列腺癌LNCa P细胞系的抑制能力减弱,说明RB1低表达的细胞系对药物敏感性下降,提示RB1基因表达状态有可能成为前列腺癌内分泌药物疗效的预测因子。