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目的:脓毒症(Sepsis)是一种危及生命的凶险疾病,大多数脓毒症患者需要进入ICU治疗,是目前危重症患者中首位致死原因.加强对sepsis发病机制的研究,探寻早期诊断及治疗sepsis的途径,对救治脓毒症患者有着相当重要的意义。TDAG8是近几年发现并开始研究的一种可以感知质子的G蛋白偶联受体。本课题中收集临床脓毒症和健康患者的外周血,检测TDAG8 mRNA和炎症因子的表达,并进一步建立脓毒症大鼠模型,检测肺组织中TDAG8 mRNA及血清中炎症因子的表达,探讨TDAG8与脓毒症的相关性,为临床脓毒症的防治提供新的理论依据。 方法:收集本院于2016年01月到2016年10月期间脓毒症患者和健康体检患者的外周血液标本(各12例,记录患者相关资料包括年龄、性别、生命体征等),提取总RNA,通过RT-PCR检测TDAG8的基因表达量;离心获得血浆,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测趋化因子8(CXCL-8)和白介素6(IL-6)浓度。尾静脉注射脂多糖(LPS,5mg/kg)建立Sepsis模型大鼠(sepsis组,与正常组各16只);正常组(NC组),尾静脉注入等量的生理盐水;LPS注射后d1及d7麻醉后收集肺组织、外周血,通过HE染色和湿/干重比值评估肺组织损伤程度,RT-PCR检测TDAG8 mRNA的表达;ELISA检测大鼠外周血血清中趋化因子8(CXCL-8)和白介素6(IL-6)浓度,分析肺组织中TDAG8表达提高与脓毒症严重程度的相关性。将数据资料以均数±标准差(Mean±SD)表示,利用t检验来比较两组间数据,相关性分析釆用直线相关分析,以P<0.05表示具有统计学意义,统计分析均由SPSS20.0软件完成。 结果:HE染色结果显示,d1时sepsis组肺组织中见部分肺泡充血、水肿,炎症细胞浸润,肺泡间隔部分增厚;d7见肺泡大面积充血、水肿,透明膜部分机化和胶原沉着,肺泡和肺间质部分纤维化。同时,sepsis组大鼠肺组织湿/干重比较正常组提高,并具有显著性,证明sepsis造模成功。RT-PCR实验显示,sepsis组大鼠肺组织及患者外周血较正常组TDAG8 mRNA的表达明显增高,并具有显著性,说明TDAG8参与了脓毒症的发生。ELISA实验显示,sepsis组大鼠及患者外周血较正常组IL-6、CXCL-8的表达明显增高,并具有显著性。直线相关性分析:IL-6与CXCL-8的表达明显相关,TDAG8 mRNA的表达与IL-6、CXCL-8的表达明显相关。ROC曲线显示TDAG8诊断脓毒症的准确性较IL-6、CXCL-8偏低。 结论:TDAG8在脓毒症大鼠的肺组织及脓毒症患者外周血中较正常组高表达,并参与脓毒症的发生;TDAG8 mRNA的表达与外周血中IL-6、CXCL-8的含量显著相关,TDAG8的表达水平联合炎症因子血液中的含量可作为早期筛查脓毒症的分子标志物,为进一步探究脓毒症的病理生理过程提供了理论依据,但TDAG8单独诊断脓毒症的准确性有待于大样本资料的进一步研究分析。