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[目的]在生理和病理状态下,采用药理学联合行为学方法分别调控基底外侧杏仁核(basolateral amygdala,BLA)多巴胺受体 1(Dopamine Receptor D1,DRD1)和多巴胺受体 2(Dopamine Receptor D2,DRD2),观察 BLA 脑区 DRD1 和 DRD2 对小鼠机械痛阈与负性情绪的影响及电针(Electroacupuncture,EA)的干预作用。[方法]本实验由三大部分实验组成。第一部分:观察杏仁核(Amygdala,AMY)脑区不同多巴胺受体与慢性神经病理性疼痛模型小鼠诱发负性情绪的关系及电针干预作用。模型小鼠在左后足进行坐骨神经分支选择性损伤(Spared Nerve Injury,SNI)造模,100 Hz电针刺激SNI模型小鼠双侧“足三里(ST36)”穴+“三阴交(SP6)”穴。采用机械测痛法检测小鼠机械缩足阈(Paw Withdrawal Thresholds,PWTs),采用小鼠高架十字迷宫实验(Elevated Plus Maze Test,EPM)和旷场实验(Open Field Test,OFT)检测焦虑样行为。采用免疫印迹法(Western blotting,WB)检测AMY脑区DRD1、DRD2在SNI组、SNI+EA组表达变化情况。第二部分:在生理和病理状态下,调控BLA脑区DRD1对慢性痛伴负性情绪的影响及电针干预作用。第三部分:在生理和病理状态下,调控BLA脑区DRD2对慢性痛伴负性情绪的影响及电针干预作用。[结果]第一部分与Sham组相比,SNI模型组小鼠在模后7 d PWTs明显降低且至少持续14 d(P<0.05),模后15 d和17 d产生明显的焦虑样行为(P<0.05),提示SNI痛情绪模型成功建立。与SNI组相比,SNI+EA组在模后14 d PWTs显著上升(P<0.05),焦虑样行为明显缓解(P<0.05)。与SNI+Sham EA组相比,SNI+EA组小鼠PWTs和焦虑样行为均有改善(P<0.05,P<0.05)。WB结果表明,与Sham组相比,SNI组小鼠AMY脑区DRD1表达减少,DRD2表达增多(P<0.05);与SNI组相比,SNI+EA组小鼠AMY脑区DRD1表达增多,DRD2表达减少(P<0.05)。第二部分(1)生理状态下,Naive+Vehicle组、Naive+DRD1拮抗剂组、Naive+DRD1拮抗剂+激动剂组和Naive+DRD1拮抗剂+电针组小鼠PWTs在7d和14d无统计学差异(P>0.05)。行为学结果显示,与Naive+Vehicle组相比,Naive+DRD1拮抗剂组出现焦虑样行为(P<0.05);与Naive+DRD1拮抗剂组相比,Naive+DRD1拮抗剂+激动剂组和Naive+DRD1拮抗剂+电针组焦虑样行为均缓解(P<0.05)。(2)病理状态下,与Sham+Vehicle组相比,14 d时 SNI+Vehicle 组 PWTs 降低(P<0.05);与 SNI+Vehicle 组相比,SNI+DRD1 激动剂组PWTs 无明显改善(P>0.05),SNI+Vehicle+电针组 PWTs 显著升高(P<0.05);与 SNI+DRD1激动剂组相比,SNI+DRD1激动剂+电针组PWTs显著升高(P<0.05)。行为学结果显示,与Sham+Vehicle组相比,SNI+Vehicle组出现焦虑样行为(P<0.05);与SNI+Vehicle组相比,SNI+DRD1激动剂组和SNI+Vehicle+电针组焦虑样行为均缓解(P<0.05);与SNI+DRD1激动剂组相比,SNI+DRD1激动剂+电针组无统计学差异(P>0.05)。第三部分(1)生理状态下,Naive+Vehicle组、Naive+DRD2激动剂组、Naive+DRD2激动剂+拮抗剂组和Naive+DRD2激动剂+电针组小鼠PWTs在7 d和14 d无统计学差异(P>0.05)。行为学结果显示,与Naive+Vehicle组相比,Naive+DRD2激动剂组出现焦虑样行为(P<0.05);与Naive+DRD2激动剂组相比,Naive+DRD2激动剂+拮抗剂组和Naive+DRD2激动剂+电针组焦虑样行为均缓解(P<0.05)。(2)病理状态下,与Sham+Vehicle 组相比,14 d 时 SNI+Vehicle 组 PWTs 降低(P<0.05);与 SNI+Vehicle组相比,SNI+DRD2拮抗剂组PWTs无明显改善(P>0.05),SNI+Vehicle+电针组PWTs显著升高(P<0.05);与SNI+DRD2拮抗剂组相比,SNI+DRD2拮抗剂+电针组PWTs显著升高(P<0.05)。行为学结果显示,与Sham+Vehicle组相比,SNI+Vehicle组出现焦虑样行为(P<0.05);与SNI+Vehicle组相比,SNI+DRD2拮抗剂组和SNI+Vehicle+电针组焦虑样行为均缓解(P<0.05);与SNI+DRD2拮抗剂组相比,SNI+DRD2拮抗剂+电针组无统计学差异(P>0.05)。[结论]1.SNI模型小鼠机械痛阈降低并诱发焦虑样行为,100 Hz电针能显著提高SNI模型小鼠的机械痛阈并缓解焦虑样行为。2.在生理状态下,拮抗BLA脑区DRD1或激活BLA脑区DRD2均能诱发Naive小鼠的焦虑样行为;在病理状态下,激活BLA脑区DRD1或拮抗BLA脑区DRD2均能有效缓解SNI小鼠焦虑样行为,但都不影响机械痛阈。电针可以通过上调BLA脑区的DRD1或下调DRD2缓解焦虑样行为。