贾第鞭毛虫（Giardia canis）是一种较为常见的人畜共患肠道寄生原虫,在全世界范围内传播。目前贾第虫的分型依据主要以宿主区分,包括8个集聚体即集聚体A-H。其中,集聚体A和B可以感染人类与哺乳动物,集聚体C和D主要感染犬科动物,集聚体E感染牛,集聚体F一般感染猫科动物,集聚体G感染鼠类,集聚体H主要感染海洋哺乳动物。在临床情况中,传统免疫学方法常使用广谱抗体检测。广谱检测对于不同集聚体检测效果有所不同。根据临床实际情况,常会出现假阳性、假阴性的误诊,错检、漏检率较高,使得实际情况与试验预期不符。单克隆抗体有着较强的特异性,可以更好的检测抗原,随着单克隆抗体技术受到广泛应用,贾第虫免疫学检测的特异性效果得到了充分的加强。本研究首先以磷酸丙糖异构酶（TPI）基因和β-贾第蛋白（BG）基因为靶基因进行鉴定,从而确定目标地区犬源贾第虫的主要分型种类,选择β-贾第蛋白（BG）和磷酸三脂异构酶（TPI）这两个单拷贝蛋白编码基因靶点,这两种基因多态性程度较高,利于分型的判断。拟以地区贾第虫犬粪阳性样本提取并培养贾第虫集聚体C滋养体,使用培养的滋养体感染的免疫小鼠,并制备相应的单克隆抗体,利用制成的单抗以夹心法胶体金技术为基础,建立定性检测的贾第虫的新型快速免疫学诊断方法。本研究主要结果如下:1.贾第虫基因型的鉴定提取的犬粪中DNA,以磷酸丙糖异构酶（TPI）基因和β-贾第蛋白（BG）基因为靶基因进行鉴定,确定其阳性感染率,进行巢式PCR扩增,PCR阳性产物经测序并将结果与Gen Bank中的贾第虫序列比对从而判断其分型。616份样品中,有48份样品检验结果为贾第虫感染阳性,阳性率为7.79%（48/616）。不同地区样品贾第虫感染率分别为:中国广州4.81%、越南胡志明市6.90%、马来西亚吉隆坡9.09%、新加坡2.86%和菲律宾马尼拉11.52%。其中48份样品在TPI和BG位点分别检测到条带,阳性率分别为7.63%和5.19%。阳性样品再经过对于BG及TPI基因位点的测序比对,得知BG位点有集聚体B型（3.33%）、集聚体C型26（86.67%）、集聚体D型（10%）,TPI位点有集聚体B型（2.12%）、集聚体C型（85.1%）、集聚体D型（12.76%）。经过统计分析比较得出各地区间贾第虫基因型差距不显著（P>0.05）,地区内贾第虫基因型差距显著（P<0.05）,中国南海周边地区存在贾第虫感染,公共卫生相对较好,地区感染率较低,犬源贾第虫基因型分布未明显受到海洋地域隔离影响。2.单克隆抗体制备及夹心法胶体金试纸条的验证通过先前实验制备的集聚体C犬粪样品培养的贾第虫滋养体,制备了两种不同的贾第虫抗原:贾第虫排泄分泌抗原;贾第虫可溶性抗原,通过制备的抗原感染免疫小鼠,使用杂交瘤细胞融合技术,筛选后得到7株能够稳定分泌单抗的细胞株,利用蛋白质印迹验证制备的单克隆抗体对贾第虫滋养体排泄分泌抗原及可溶性抗原成功识别。其中FG4株识别180k Da及175k Da的条带,且对于犬艾利西体、犬心丝虫、血吸虫虫卵等抗原没有免疫交叉反应现象。使用制备的单克隆抗体建立双抗体夹心法胶体金试纸,该试纸制成试制样品后,通过与犬艾利西体、犬心丝虫、血吸虫虫卵等抗原反应,没有出现阳性结果,具有较好的特异性;与贾第虫滋养体样品检测极限不低于0.125μg,具有较强的敏感性。通过对于犬粪样品的检测后,该试纸验出率为90%,高于英国J&G公司试纸70%验出率。综上所述,本研究得出以下结论:1.南海周边地区的犬类存在贾第虫感染情况,感染的贾第虫以集聚体C为主,存在集聚体B、集聚体D。2.以集聚体C贾第虫滋养体制备的抗体,可以识别滋养体可溶性抗原以及排泄分泌抗原,并且与犬艾利西体、犬心丝虫、血吸虫虫卵无交叉反应,有良好的特异性。3.基于集聚体C抗体建立的胶体金试纸,可用于犬粪贾第虫抗原的检测,并有较高的敏感性、特异性、稳定性。