目的皮肤组织中有多种免疫细胞驻留,成为抵御病原体入侵的第一道防线,其中树突状细胞（Dendritic cells,DCs）发挥着重要的前哨功能。皮肤免疫反应的结果很大程度上依赖于DCs从皮肤迁移到引流淋巴结的能力。DCs是骨髓来源的具有高度特异性的抗原提呈细胞（Antigen-presenting cells,APCs）,在免疫应答的诱导和调节中发挥着重要作用。朗格汉斯细胞（Langerhans cells,LCs）被归类为DCs,是表皮的免疫细胞。LCs摄取加工抗原后,从表皮迁移到引流淋巴结,将抗原呈递给T细胞,诱导免疫原性或耐受性反应。MMP-13是基质金属蛋白酶（Matrix Metalloproteinase,MMPs）中胶原酶亚家族的成员,在细胞外基质循环、癌细胞迁移、细胞生长、炎症、血管生成等方面发挥重要作用。目前已有研究在小鼠骨髓源性树突状细胞（Bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs）中发现MMP-13的存在。相比于其他MMPs（如MMP-2和MMP-9）,MMP-13的表达模式更受DCs限制。目前对于MMP-13在DCs中的功能研究仍不确切。本实验通过应用Cre/lox P系统构建了在DCs上特异性MMP-13敲除（Knock-out,KO）的小鼠,提取小鼠骨髓细胞诱导培养成DCs,并对小鼠耳表皮内的LCs进行检测以研究MMP-13在DCs中的作用,为进一步探讨MMP-13对DCs功能的影响提供理论支撑。方法本研究选取6-8周的C57BL/6J小鼠作为研究对象,通过Cre/lox P系统构建了在DCs上特异性MMP-13 KO的小鼠（KO型小鼠）作为实验组和没有Cre活性的MMP-13 lox P纯合小鼠（lox P型小鼠）作为对照组。采用免疫组织化学染色法对小鼠耳朵表皮内的LCs进行染色,观察KO型小鼠和lox P型小鼠耳表皮内LCs形态,并在10×40倍光镜下随机选取5个视野对LCs的细胞数量及树突数量进行统计分析。分离提取小鼠骨髓细胞在体外诱导分化为BMDCs。将从KO型小鼠骨髓中提取并诱导生成的特异性MMP-13 KO的BMDCs(下文简称为MMP-13-KODCBMDCs)作为实验组,将从lox P型小鼠骨髓中提取并诱导的野生型BMDCs(下文简称为WTloxBMDCs)作为对照组。对MMP-13-KODCBMDCs和WTloxBMDCs进行细胞功能学检测。使用CCK-8试剂盒检测MMP-13-KODCBMDCs和WTloxBMDCs的增殖能力。使用流式细胞仪对MMP-13-KODCBMDCs和WTloxBMDCs表面成熟标记物CD80、CD86及MHCⅡ的表达以及细胞凋亡比例和细胞吞噬能力进行检测。结果1.与lox P型小鼠表皮LCs相比,KO型小鼠表皮LCs的胞体萎缩,树突减少,细胞数量减少。2.与野生型的BMDCs相比,MMP-13敲除后的BMDCs的CCK-8增殖活性没有显著差异。3.与野生型的BMDCs相比,MMP-13敲除后的BMDCs表面成熟标记物CD80,CD86和MHCⅡ的表达下降。4.与野生型的BMDCs相比,MMP-13敲除后的BMDCs摄取FITC-Dextran的细胞比例升高。5.与野生型的BMDCs相比,MMP-13敲除后的BMDCs的凋亡细胞比例升高。结论1.小鼠表皮LCs在MMP-13缺失后,细胞形态异常,细胞数目减少。2.在DCs中特异性敲除MMP-13后,BMDCs的成熟能力下降,抗原吞噬能力提高,细胞凋亡增加,增殖能力不受影响。