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品质改良是小麦育种的重要目标之一。麦谷蛋白和醇溶蛋白一起构成其它粮食作物所欠缺的面筋,是小麦品质的决定因素,其中麦谷蛋白赋予面团弹性。麦谷蛋白包括高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)和低分子量麦谷蛋白亚基(LMW-GS),其亚基具有丰富的多态性且其等位基因亚基组成对品质有重要的影响。HMW-GS的亚基组成国内外已有较多的研究,其对品质的影响也有较为一致的结论;但由于研究材料方法等的原因,更多的亚基鉴定及对品质的作用尚存在争议。LMW-GS由于其复杂的带型及多种命名体系的存在,其对品质的作用没有统一的、综合的、标准的结论,国内小麦品种的LMW-GS组成尚是空白。本文以育种应用为目标,对亚基的组成类型、等位亚基及其互作对品质的影响进行分析:①选取277份来自黄淮、长江中下游地区推广的,育种单位的高代品种(系),以及部分种质资源和国外引进资源,利用SDS-PAGE方法分析了它们的高分子量麦谷蛋白亚基的组成。②利用7对低分子量麦谷蛋白Glu-A3位点等位基因的特异引物标记,用PCR方法分析200份中国小麦微核心种质的Glu-A3位点的分布状况。③用郑麦9023/安农9267、皖麦19/安农9267/皖麦19、#445/陕225//安农91168/3/皖麦19的F5株系和烟农19/安农9914、烟361/安农9916的F3株系组成8个重组自交后代群体,共691个穗系,田间采用随机区组增广设计,分别检测HMW-GS、LMW-GS的组成,测定了揉面仪指标和SDS沉降值,分析了麦谷蛋白亚基等位基因对品质性状的影响。④采用一对杂交组合烟361×安农9914的后代,随机选择至F4代建成重组自交后代群体,共871个穗系,田间采用随机区组增广设计。以此为材料分别检测它们的HMW-GS、LMW-GS组成;其面筋强度及面团流变学特性用揉面仪和SDS沉降试验测定;并分析高分子量麦谷蛋白等位亚基及其互作对品质影响。得出以下结论:
1.对277份来自黄淮、长江中下游地区推广的,育种单位高代品种(系),以及部分种质资源和国外引进资源的HMW-GS分析表明,Glu-A1位点,共检测出1、2*、N三种亚基类型,其中以1亚基的频率最高达到49%,其次为N亚基为44.77%,二者占总品种数的94.22%,2*亚基的频率最小。在Glu-B1位点的等位变异类型最丰富,共检测出8种变异类型,其中以7+9和7+8为最多,分别为38.99%和36.10%,其次为14+15,为12.64%,其它等位亚基所占数目较少。在Glu-D1位点共检测出四种等位类型,其中以2+12亚基类型为最多占44.77%,其次为5+10亚基占33.94%和4+12亚基占19.49%。对各亚基组合的分布,检测出43种组合,可见亚基组合在当前品种中的分布并非随机。其中以N,7+8,2+12在各品种中所占频率为最高,其值为12.64%,其次为N,7+9,2+12,占9.39%;1,7+8,2+12,占7.94%;N,14+15,4+12,占5.42%,其余亚基类型所占比例较低。
2.在鉴定中国小麦微核种质的Glu-A3分布中,表明PCR方法能够鉴定出各等位基因,并且易于发现新的等位基因;确定了中国微核心种质中197份品种的Glu-A3位点等位基因名称,鉴别出3份品种为新的未知等位基因类型;其中以c、a、d三个等位亚基的品种数目为多,分别占总品种数的44.5%、26%、14.5%,亚基b占4.5%,e占5.5%,f占1%,g占2.5%,未知类型占1.5%。可见在我国种质资源中,对面筋强度作用较大的b、d亚基的数目较少,尤其是b亚基,仅占4.5%;而对面筋强度作用最小的c亚基,却在种质中占44.5%。
3.利用8个杂交后代群体研究表明,在G1u-D1位点,5+10亚基SDS沉降值显著高于2+12,揉面仪参数中峰高及和面时间5+10显著高于2+12,衰落角差异不明显;2+12亚基与4+12亚基二者对SDS沉降值的影响差异不显著,对和面仪参数的各指标差异也不显著。Glu-B1位点,SDS沉降值17+18亚基高于14+15亚基,峰高与衰落角两对亚基间差异不显著,和面时间17+18亚基显著高于14+15亚基;等位亚基7+8与14+15,SDS沉降值亚基间差异不显著,和面时间7+8亚基大于14+15,衰落角7+8显著小于14+15。对于存在LMW-GS差异的群体,其中一个群体的Glu-D3e亚基SDS沉降值显著高于Glu-D3a,其它三个群体亚基间差异不显著,在和面时间、峰高及衰落角三项指标,Glu-D3a/Glu-D3e间差异不显著。
4.组合烟361×安农9914的后代群体麦谷蛋白组成,仅在Glu-Al(1或N亚基)与Glu-B1(14+15或17+18亚基)位点有差异。Glu-A1位点1亚基的SDS沉降值显著高于N亚基,l亚基的峰高、7分钟尾高显著大于N亚基。和面时间、7分钟带宽以及耐揉性有关的指标衰落角,两亚基间差异不显著。Glu-B1位点其SDS沉降值亚基间17+18>14+15/17+18>14+15,且相互间差异达到极显著水平;和面时间,7分钟带宽两个指标17+18亚基显著高于14+15亚基;17+18亚基的衰落角值显著小于14+15,峰高和7分钟尾高,17+18与14+15差异不显著。对Glu-A1和Glu-B1两位点互作,SDS沉降值、5个和面图参数的方差分析结果表明,7分钟带宽互作达5%显著水平,其它4个指标都未达显著水平,其最优组合可按加性效应进行决选。