背景 表皮细胞培养用于探讨表皮生物学特性以及多种皮肤病的发病机理，也可用于皮肤药理学，在烧伤外科及整形外科中亦有着广阔的前景。人类进行表皮细胞体外培养已有100余年的历史，很长时间内不能解决人表皮细胞的体外长期大量培养问题，直到1975年Rheinwald和Green利用放射致死的3T3鼠成纤维细胞作为表皮细胞培养的滋养层细胞，才使表皮细胞的体外长期培养扩增成为可能。随着现代分子生物学和组织工程学的迅猛发展，以及研究手段和实验条件的进一步改善，表皮角质形成细胞培养在理论和技术上都有了不断的发展和完善。 关于表皮细胞体外培养的适宜方法和条件，国内外已有不少报道。然而，关于表皮细胞的分离液成分方面对表皮的克隆形成率，融合天数等细胞生物学性质的影响却缺乏深入的对比研究。为建立适宜的稳定培养条件，包括滋养层问题，培养液内容问题，尤其是关于表皮细胞分离液成分等问题，我们对正常人表皮生物工程中的适宜条件进行了探讨。此外，为了获得更多的表皮深层细胞，我们还对分离表皮后的表皮细胞通过不同孔径的尼龙布纱网过滤，对比不同的尼龙布纱网滤过的表皮细胞中深层细胞(主要指表皮干细胞)与中、浅层细胞的比例，为有关表皮生物学进一步提供理论资料并为表皮生物工程研究奠定实验基础。 材料与方法 标本均取自我院2005年5月-2005年8月泌尿外科门诊及住院包皮过长患者4例。年龄24-35岁。经各项检查证实无心、肝、肺、内分泌、神经系统疾病及肿瘤。以NIH-3T3细胞作为滋养层，以热溶素分离表皮与真皮，分离表皮细胞应用