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聚乙烯亚胺(PEI)是一种具有大量胺基(伯胺、仲胺、叔胺)的水溶性高分子聚合物。PEI中的胺基容易质子化使其表面带有大量正电荷,可以吸附一些阴离子染料,同时还可以螯合重金属离子。另外,PEI表面富含活性胺(伯胺,仲胺),能与多种化合物(醛,环氧等)以及酸性气体发生反应。支化PEI是PEI的结构之一,因其具有高支化结构和反应活性强等优点,常被用作合成荧光材料的前体或保护剂。鱼精蛋白也是一种含有大量碱性氨的蛋白质。本论文是利用对苯二酚易在碱性溶液中被空气中的氧气氧化生成对苯醌,对苯醌与胺基发生席夫碱缩合反应生成荧光聚合物纳米材料构建荧光传感器。研究内容主要包括以下三个方面:
1、利用对苯二酚交联支链聚乙烯亚胺(PEI)合成荧光聚合物纳米粒子(FPNs),通过透射电镜(TEM),红外光谱(FTIR)和X射线光电子能谱(XPS)等对FPNs进行了表征。实验发现该聚合物纳米粒子的荧光强度与反应物对苯二酚的浓度有关。利用该聚合物纳米粒子的发光特点构建了以β-熊果苷/PEI为底物用于测定β-葡萄糖苷酶活性的荧光“开”型传感器。首先β-葡萄糖苷酶水解β-熊果苷(对-羟基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷)释放对苯二酚,然后对苯二酚在碱性下被氧化为对苯醌,接着对苯醌与非荧光PEI底物发生席夫碱缩合,通过共价交联,从而形成水溶性FPNs。实验发现,聚合物纳米粒子的荧光强度与体系中β-葡萄糖苷酶的活性有关。聚合物纳米粒子体系的荧光强度随着加入β-葡萄糖苷酶的活性的增加而逐渐增强,且在选定的最佳条件下,1.0~36.0UL?1范围内β-葡萄糖苷酶活性与体系荧光强度呈线性关系。据此建立了一种检测β-葡萄糖苷酶的新方法,此方法可测定的β-葡萄糖苷酶活性的检出限为0.4UL?1。
2、构建了一种利用硫酸鱼精蛋白检测对苯二酚的方法。鱼精蛋白是一种含胺的聚合物蛋白质,该蛋白质本身不发射荧光。实验发现对苯二酚能够交联硫酸鱼精蛋白合成荧光聚合物纳米粒子(HPNP),其荧光激发波长和发射波长分别为333nm和430nm。通过TEM,FTIR和XPS等对HPNP进行了表征。当往一定的量的硫酸鱼精蛋白中加入对苯二酚时,随着体系中不断增加对苯二酚,交联原位生成的荧光聚合物纳米粒子的荧光逐渐增强。在选定的最佳条件下,当硫酸鱼精蛋白的浓度为1.1gL?1,对苯二酚浓度为0~25μmolL?1时,加入对苯二酚的浓度与聚合物纳米粒子的荧光强度呈良好的线性关系,检测限为0.1μmolL?1。据此建立了一种检测对苯二酚有机污染物的新方法。
3、使用五乙撑六胺(PEN)和对苯二酚为原料制备一种具有较强荧光的聚合物纳米材料(PNs)。基于内滤光效应,PNs的荧光能够被二氧化锰(MnO2)纳米片有效猝灭形成发光聚合物/二氧化锰复合体系(PNs-MnO2)。用扫描电镜(SEM),TEM和FTIR等对PNs和MnO2纳米片进行了表征。通过α-葡萄糖苷酶水解L-抗坏血酸2-葡糖苷释放出L-抗坏血酸还原MnO2纳米片,从而使聚合物纳米材料的荧光恢复。在选定的最佳条件下,α-葡萄糖苷酶的活性为0~7.2UmL?1时,实验发现体系荧光强度与加入α-葡萄糖苷酶的活性成线性关系,检测限为0.05UmL?1,据此建立了一种利用PNs-MnO2复合纳米材料体系检测α-葡萄糖苷酶的新方法。
1、利用对苯二酚交联支链聚乙烯亚胺(PEI)合成荧光聚合物纳米粒子(FPNs),通过透射电镜(TEM),红外光谱(FTIR)和X射线光电子能谱(XPS)等对FPNs进行了表征。实验发现该聚合物纳米粒子的荧光强度与反应物对苯二酚的浓度有关。利用该聚合物纳米粒子的发光特点构建了以β-熊果苷/PEI为底物用于测定β-葡萄糖苷酶活性的荧光“开”型传感器。首先β-葡萄糖苷酶水解β-熊果苷(对-羟基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷)释放对苯二酚,然后对苯二酚在碱性下被氧化为对苯醌,接着对苯醌与非荧光PEI底物发生席夫碱缩合,通过共价交联,从而形成水溶性FPNs。实验发现,聚合物纳米粒子的荧光强度与体系中β-葡萄糖苷酶的活性有关。聚合物纳米粒子体系的荧光强度随着加入β-葡萄糖苷酶的活性的增加而逐渐增强,且在选定的最佳条件下,1.0~36.0UL?1范围内β-葡萄糖苷酶活性与体系荧光强度呈线性关系。据此建立了一种检测β-葡萄糖苷酶的新方法,此方法可测定的β-葡萄糖苷酶活性的检出限为0.4UL?1。
2、构建了一种利用硫酸鱼精蛋白检测对苯二酚的方法。鱼精蛋白是一种含胺的聚合物蛋白质,该蛋白质本身不发射荧光。实验发现对苯二酚能够交联硫酸鱼精蛋白合成荧光聚合物纳米粒子(HPNP),其荧光激发波长和发射波长分别为333nm和430nm。通过TEM,FTIR和XPS等对HPNP进行了表征。当往一定的量的硫酸鱼精蛋白中加入对苯二酚时,随着体系中不断增加对苯二酚,交联原位生成的荧光聚合物纳米粒子的荧光逐渐增强。在选定的最佳条件下,当硫酸鱼精蛋白的浓度为1.1gL?1,对苯二酚浓度为0~25μmolL?1时,加入对苯二酚的浓度与聚合物纳米粒子的荧光强度呈良好的线性关系,检测限为0.1μmolL?1。据此建立了一种检测对苯二酚有机污染物的新方法。
3、使用五乙撑六胺(PEN)和对苯二酚为原料制备一种具有较强荧光的聚合物纳米材料(PNs)。基于内滤光效应,PNs的荧光能够被二氧化锰(MnO2)纳米片有效猝灭形成发光聚合物/二氧化锰复合体系(PNs-MnO2)。用扫描电镜(SEM),TEM和FTIR等对PNs和MnO2纳米片进行了表征。通过α-葡萄糖苷酶水解L-抗坏血酸2-葡糖苷释放出L-抗坏血酸还原MnO2纳米片,从而使聚合物纳米材料的荧光恢复。在选定的最佳条件下,α-葡萄糖苷酶的活性为0~7.2UmL?1时,实验发现体系荧光强度与加入α-葡萄糖苷酶的活性成线性关系,检测限为0.05UmL?1,据此建立了一种利用PNs-MnO2复合纳米材料体系检测α-葡萄糖苷酶的新方法。