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本课题以包被脂肪酶(CT-LIP)为试验材料,体外试验研究CT-LIP的温度稳定性和pH稳定性、耐干热和耐湿热性,以及在人工胃液、人工肠液中的耐受性。并以断奶仔猪为试验对象,研究了其对生产性能、免疫功能、消化酶活性和肠道形态的影响,旨在探讨CT-LIP在断奶仔猪上的应用效果,为其作为新型包被酶制剂在养殖生产中的应用提供科学依据。
主要研究结果如下:
1.体外试验
(1) CT-LIP在人工胃液中的耐受性
在人工胃液1-5 h的作用下,随着时间的增加,CT-LIP的酶活性先上升后下降,在4h达到最高值;而非包被脂肪酶(UC-LIP)的酶活性则不断下降。表明CT-LIP较UC-LIP具有更强的耐人工胃液作用。
(2) CT-LIP在人工肠液中的耐受性
在人工肠液1-6 h的作用下,随着时间的增加,CT-LIP的酶活性先上升后下降,在2h达到最高值;而UC-LIP的酶活性则不断下降。在2-4 h内,CT-LIP的酶活性一直高于UC-LIP。表明CT-LIP较UC-LIP具有更强的耐人工肠液作用。
(3) CT-LIP的温度稳定性
在40-100℃的温度范围内,与UC-LIP相比,CT-LIP具有更强的耐高温作用。
(4) CT-LIP的pH稳定性
在pH为3-7的酸性环境中,CT-LIP较UC-LIP具有耐酸性。在pH为8-12的碱性环境中,CT-LIP较UC-LIP具有耐碱性。
(5) CT-LIP的耐干热和耐湿热性
经干热处理后,与UC-LIP相比,CT-LIP的残存酶活率提高了5.67%。经湿热处理后,与UC-LIP相比,CT-LIP的残存酶活率提高了35.60%。表明CT-LIP较UC-LIP具有更强的耐干热和耐湿热性。
2.体内试验
选择120头体重为8.72 kg左右断奶仔猪,随机分为5组(每组3个重复,每个重复8头)。基础日粮组不添加任何外源脂肪酶制剂(对照组),其它组在基础日粮基础上分别添加100 mg/kg和200 mg/kg UC-LIP以及100 mg/kg和200mg/kg CT-LIP日粮。试验猪自由采食,自由饮水,预试期7天,正试期28天。饲养试验结束后,从实验组中选取200 mg/kg UC-LIP、200mg/kg CT-LIP及对照组各组中随机选取试验猪(公母各半,每重复2头)各6头,共18头。并按常规方法进行屠宰、取样以及生理生化指标的测定。
(1) CT-LIP对生长性能结果
与对照组相比,100 mg/kg UC-LIP组、200 mg/kg UC-LIP组、100 mg/kgCT-LIP组和200 mg/kg CT-LIP组的ADG分别提高了6.12%(P>0.05)、13.56%(P<0.05)、20.70%(P<0.05)和27.26%(P<0.05);腹泻率分别降低了6.85%(P<0.05)、21.54%(P<0.05)、23.38%(P<0.05)和44.43%(P<0.05);100 mg/kgCT-LIP和200 mg/kg CT-LIP组的F/G分别降低了18.10%(P<0.05)和22.41%(P<0.05)。
(2) CT-LIP对血清生化指标的结果
与对照组相比,200 mg/kg UC-LIP和200 mg/kg CT-LIP组血清TP含量分别提高4.38%(P>0.05)和19.71%(P<0.05); LDL含量分别降低20.21%(P<0.05)和24.87%(P<0.05); SUN含量分别降低14.45%(P>0.05)和20.22%(P<0.05);TG含量分别降低17.65%(P<0.05)和36.76%(P<0.05); FFA含量分别提高37.93%(P<0.05)和75.86%(P<0.05); LIP活力分别提高13.33%(P<0.05)和30.67%(P<0.05)。与200 mg/kg UC-LIP相比,200 mg/kg CT-LIP组血清TP和FFA分别提高14.69%(P<0.05)和27.50%(P<0.05); SUN和TG含量分别降低6.75%(P<0.05)和23.21%(P<0.05); LIP活力提高15.29%(P<0.05)。
(3) CT-LIP对抗氧化能力和免疫指标的结果
与对照组相比,200 mg/kg UC-LIP和200 mg/kg CT-LIP组血清T-AOC分别提高8.53%(P<0.05)和57.94%(P<0.05);血清GSH-Px活性分别提高3.30%(P>0.05)和17.30%(P<0.05);血清SOD活性分别提高2.97%(P>0.05)和12.47%(P<0.05)。与200 mg/kg UC-LIP相比,200 mg/kg CT-LIP组血清T-AOC和GSH-Px分别提高45.53%(P<0.05)和13.54%(P<0.05)。
与对照组相比,200 mg/kg CT-LIP组肝脏T-AOC提高50.72%(P<0.05),肝脏SOD活性分别提高18.24%(P<0.05)。与200 mg/kg UC-LIP组相比,200 mg/kgCT-LIP组肝脏T-AOC提高48.57%(P<0.05)和肝脏SOD活性提高15.00%(P<0.05)。
与对照组相比,200 mg/kg CT-LIP组IgM含量提高44.05%(P<0.05)。与200mg/kg UC-LIP组相比,IgM含量同样提高44.05%(P<0.05)。
(4) CT-LIP对内源性消化酶活性的结果
与对照组相比,200 mg/kg UC-LIP和200 mg/kg CT-LIP组胰脏中脂肪酶活性分别提高41.25%(P<0.05)和63.27%(P<0.05)。与200 mg/kg UC-LIP组相比,200 mg/kg CT-LIP组脂肪酶活性提高15.58%(P<0.05)。
与对照组相比,200 mg/kg UC-LIP和200 mg/kg CT-LIP组十二指肠内容物中胰蛋白酶活性分别提高17.71%(P<0.05)和32.48%(P<0.05);脂肪酶活性分别提高44.87%(P<0.05)和70.77%(P<0.05);淀粉酶活性分别提高23.71%(P>0.05)和69.30%(P<0.05)。与200 mg/kg UC-LIP组相比,200 mg/kg CT-LIP组胰蛋白酶活性提高12.55%(P<0.05);脂肪酶活性提高17.87%(P<0.05)。
(5) CT-LIP对小肠肠道形态的结果
与对照组相比,200 mg/kg UC-LIP和200 mg/kg CT-LIP组对十二指肠的绒毛高度分别提高7.24%(P<0.05)和15.25%(P<0.05);隐窝深度分别降低5.69%(P>0.05)和10.99%(P<0.05);绒毛高度/隐窝深度的比值分别提高13.66%(P<0.05)和29.51%(P<0.05)。对空肠的绒毛高度分别提高6.52%(P<0.05)和14.68%(P<0.05);隐窝深度分别降低12.20%(P<0.05)和16.81%(P<0.05);绒毛高度/隐窝深度的比值分别提高20.90%(P<0.05)和37.29%(P<0.05)。与200 mg/kg UC-LIP组相比,200 mg/kg CT-LIP组对十二指肠和空肠的绒毛高度分别提高7.47%(P<0.05)和7.66%(P<0.05);绒毛高度/隐窝深度的比值分别提高13.94%(P<0.05)和13.55%(P<0.05)。
上述结果提示:(1)体外试验表明,CT-LIP较UC-LIP具有更强的耐人工胃液和肠液、耐高温、耐酸碱性、耐干热和耐湿热性。(2)体内试验表明,日粮中添加CT-LIP可以提高断奶仔猪的生产性能,降低腹泻率;促进血清脂类代谢和蛋白质代谢;提高血清的免疫指标以及血清和肝脏的抗氧化能力;提高胰脏和十二指肠内容物中内源性消化酶的活性以及改善小肠肠道形态。