【摘 要】
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目的:探讨不同浓度芒柄花黄素对PC-3前列腺癌细胞增殖作用的影响及其作用机制,希望能为前列腺癌的临床治疗提供广泛的治疗方向以及对中药的临床应用提供可靠的依据。方法:MTT
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目的:探讨不同浓度芒柄花黄素对PC-3前列腺癌细胞增殖作用的影响及其作用机制,希望能为前列腺癌的临床治疗提供广泛的治疗方向以及对中药的临床应用提供可靠的依据。方法:MTT法通过针对不同浓度芒柄花黄素作用后前列腺癌PC-3细胞的OD值的检测。用流式细胞术对不同浓度芒柄花黄素作用后PC-3细胞周期的变化进行检测。而对于PC-3细胞经芒柄花黄素作用后中细胞周期相关因子Cyclin D1和CDK4 mRNA表达情况采用荧光定量PCR试验检测。通过蛋白免疫印迹试验来对不同浓度芒柄花黄素作用后前列腺癌细胞Cyclin D1,CDK4蛋白水平以及p-Akt水平。体内实验主要通过构建裸鼠移植瘤模型实验进行腋下注射PC-3肿瘤细胞,持续不同浓度药物注射并定期观察肿瘤的生长情况。无菌条件取出裸鼠体内增殖的瘤体,进行称量,计算并比较不同浓度芒柄花黄素对小鼠体内肿瘤细胞增殖的抑制率。结果:MTT实验中芒柄花黄素能对PC-3前列腺癌细胞的增殖表现出一定的抑制作用。流式细胞术试验后,随芒柄花黄素浓度的增加,G0/G1期细胞数目呈剂量依赖性递增趋势。PCR实验显示,前列腺癌PC-3细胞经芒柄花黄素处理后,其Cyclin D1以及CDK4等细胞周期相关因子mRNA的表达量均显著降低,且与芒柄花黄素呈剂量相关性。蛋白免疫印迹实验结果表明,前列腺癌细胞中Cyclin D1、CDK4蛋白的表达量以及p-Akt蛋白水平随芒柄花黄素浓度呈负相关。小鼠体内移植瘤模型结果也显示植物雌激素芒柄花黄素对裸鼠体内移植瘤的增殖方面具有显著的抑制效应,且其抑制作用与芒柄花黄素浓度正相关。结论:植物雌激素芒柄花黄素能够通过促使前列腺癌PC-3细胞更多地停留于G1期发生细胞停滞从而对前列腺癌细胞的增殖产生抑制作用。其中的机制可能是其通过对细胞内Cyclin D1、CDK4 mRNA以及它们的蛋白水平的下调,并通过抑制p-Akt水平而实现的,且下调水平和芒柄花黄素浓度正相关。
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