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目的水通道蛋白是一组与液体平衡有关的细胞膜转运蛋白,大量证据表明AQPs与ARDS肺水的代谢和转运密切相关,其中AQP1和AQP5对维持肺内外液体平衡共同发挥着重要作用。川芎嗪的有效成分是TMP,研究业已证实其具有缓解肺水肿的药理作用,但TMP对肺水肿的改善作用是否与水通道蛋白1、5密切相关,目前尚不清楚。为了证实这一假设,我们通过细胞和动物两个层面,构建ARDS的体外和体内模型,观察川芎嗪对急性呼吸窘迫综合征非心源性肺水肿的影响,并探讨水通道蛋白1、5表达的调节是否为其作用的可能靶点之一。方法构建ARDS的体外和体内模型,将A549细胞和SD大鼠随机分为正常对照组(N组)、TMP处理组(T组)、LPS刺激组(L组)、TMP治疗组(LT组)。MTT法检测细胞体外增殖,实时定量PCR技术(RT-q PCR)检测各组细胞AQP1、AQP5m RNA水平。通过观察大鼠的一般情况及动脉血气分析证实造模是否成功,肺组织病理学改变和湿/干重比验证肺水肿变化,RT-q PCR检测各组大鼠肺组织AQP1和AQP5m RNA水平,免疫组化和免疫印迹技术(Western blot)检测AQP1、AQP5蛋白表达。结果经MTT法检测LPS和TMP对A549细胞增殖的影响后,确定LPS的最佳作用浓度为5-10mg/L、TMP的安全范围为10-50mg/L。观察大鼠一般情况及动脉血气分析结果证实尾静脉注射10mg/kg LPS复制ARDS模型成功,通过肺组织病理改变和湿/干重比观察到TMP处理组肺水肿缓解。RT-q PCR检测各组细胞和大鼠肺组织AQP1、AQP5m RNA结果显示TMP处理组AQP1和AQP5m RNA水平高于对照组(P<0.05);而LPS刺激组两者水平降低(P<0.05);同时,与LPS刺激组相比,TMP治疗组AQP1、AQP5转录水平上升,但低于N、T两组,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化和Western blot检测各组大鼠肺组织AQP1、AQP5蛋白表达情况与m RNA水平一致。结论川芎嗪可有效缓解ARDS时的非心源性肺水肿,其可能机制之一或与上调受抑制的AQP1和AQP5表达有关,水通道蛋白1、5可能作为ARDS治疗的其中一个潜在靶点。