重组植物表达质粒pBI-th和pBI-GFP的构建及V-cath基因的克隆与表达

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一、重组植物表达质粒pBI-th、pBI-GFP的构建.该文利用定向克隆、单酶插入等分 子生物学技术,分别将绿色荧光蛋白基因(GFP),及植物甜蛋白(thaumatin)基因克隆至植物表达载体pBI121中,成功的构建了重组植物表达质粒pBI-th和pBI-GFP.二、苜蓿银纹夜蛾 核型多角体病毒的组织蛋白酶基因(v-cath)的克隆及原核表达:v-cath基因是一种病毒的组织蛋白酶基因,其编码蛋白具有水解肌动蛋白的蛋白酶活性,可能参与病毒感染后期宿主的组织液化,该文通过PCR扩增,从AcMNPV的基因组中获得v-cath基因,将其克隆至原核表达 载体pRSET B中,成功的构建了重组原核表达质粒pRSET-vcath.并在大肠杆菌中进行诱导表达.利用SDS-PAGE确定了表达产物的分子量并初步研究了表达量与诱导时间之间的关系.
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