过敏性紫癜(Henoch-Schonlein Purpura,HSP)是一种由IgA免疫复合物沉积介导的小血管炎症性疾病,常见于儿童。本病病因学尚不完全清楚,过敏性紫癜性肾炎是其常见并发症。HSP属中医“血证”、“葡萄疫”、“发斑”范畴。青紫合剂是北京儿童医院院内制剂,由青黛、紫草、绵马贯众、丹参、白芷、寒水石、威灵仙、茵陈等中药组成,具有祛风解毒,凉血消斑的功效,对HSP有确切疗效。青紫颗粒是青紫合剂经改剂型制备的颗粒剂。本研究基于其功效主治及过敏性紫癜可能的发病机制,建立卵蛋白(Ovalbumin,OVA)所致过敏性紫癜大鼠模型和麦胶蛋白所致过敏性紫癜小鼠模型,观察青紫颗粒对过敏性紫癜肾脏损害的影响并初步探讨其作用机制。1青紫颗粒对卵蛋白所致过敏性紫癜大鼠肾脏损伤的影响目的:观察青紫颗粒对卵蛋白(OVA)所致肾型过敏性紫癜大鼠血清免疫球蛋白A(IgA)、循环免疫复合物(CIC)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、白介素-6(IL-6)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)水平及皮肤、肾脏组织病理学影响。方法:SPF级SD大鼠,随机分为正常组,模型组,青紫颗粒低剂量组(4.58g·kg-1)、中剂量组(9.16 g·kg-1)、高剂量组(18.32 g·kg-1地塞米松组(0.55 mg·kg-1),芦丁片组(12.05 mg·kg-1)。采用中西医结合方法,复制过敏性紫癜病证结合模型。除正常组外,其余各组以胡椒、干姜、荜茇=1:1:1的水煎液(0.125 g·kg-1)1.2 ml灌胃,每日两次,连续灌胃21日,模拟中医血热证造模。第22日大鼠腹腔注射含OVA、氢氧化铝凝胶、LPS及伊文思蓝的生理盐水溶液每只1 ml,并于当日按剂量灌服药液,正常组、模型组灌服等量溶媒,连续7日。第29日大鼠腹腔注射上述生理盐水溶液10 min内,皮肤外涂含OVA、氢氧化铝凝胶及LPS的生理盐水溶液1 ml以激发过敏反应。30 min后取血,ELISA法检测血清IgA、CIC、SAA、IL-6、ET-1、NO水平;取皮肤、肾脏,HE染色法观察组织病理学变化。结果:与正常组比较,模型组血清IgA、CIC、SAA、IL-6、ET-1、NO水平升高(P<0.05或P<0.01),肾组织病理损伤明显。青紫颗粒可降低OVA所致过敏性紫癜大鼠血清IgA、CIC、SAA、IL-6、ET-1、NO水平(与模型组比较,P<0.05或P<0.01),减轻肾脏病理损伤。结论:青紫颗粒能降低OVA所致过敏性紫癜大鼠血清IgA、CIC、SAA、IL-6、ET-1、NO水平,改善肾脏组织病理损伤。2青紫颗粒对麦胶蛋白所致过敏性紫癜小鼠肾脏损伤的影响目的:观察青紫颗粒对麦胶蛋白所致过敏性紫癜小鼠血清晚期氧化蛋白产物(AOPPs)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,皮肤、肾脏IgA沉积和IgA1异常糖基化,补体C3、C4、TGF-β1表达及组织病理学的影响。方法:SPF级KM小鼠,随机分为正常组,模型组,青紫颗粒低剂量组(4.11 g·kg-1)、中剂量组(8.22 g·kg-1)、高剂量组(16.44 g·kg-1),地塞米松组(0.63 mg·kg-1),芦丁片组(12.54 mg-kg-1)。采用口服麦胶蛋白抗原法,复制过敏性紫癜小鼠模型。除正常组外,其余各组以0.4 mg/10g尾静脉注射印度墨水3周,每周1次,正常组尾静脉注射等量生理盐水。3周后模型小鼠灌胃6 mmol/LHCl酸化水溶解的0.1%麦胶蛋白0.5ml/只,连续至14周末,隔日1次,正常组以相同溶媒处理。造模的最后3日,用1 mg麦胶蛋白加入5 mmol/LHCl酸化的pH7.4的PBS液中,尾静脉注射,0.2 ml/只,每日1次,连续3日。正常组小鼠尾静脉注射等量PBS溶液。从第15周开始,各给药组每日灌胃1次,连续3周,正常组、模型组灌胃相同体积蒸馏水。各组摘眼球取血,ELISA法检测血清AOPPs、CIC、BUN、Cr水平;取皮肤及肾脏,免疫荧光法检测单纯IgA沉积,PAS染色法观察组织IgA1异常糖基化情况,免疫荧光法检测小鼠皮肤及肾脏补体C3、补体C4及TGF-β1的表达,HE染色法观察组织病理学变化。结果:与正常组相比,模型组血清AOPPs、CIC、BUN、Cr水平均升高(P<0.05或P<0.01),模型组皮肤补体C3、TGF-β1表达增加(P<0.05或P<0.01),肾脏IgA、补体C4表达增加(P<0.05或P<0.01),皮肤及肾脏均有IgA1异常糖基化发生,肾组织病理损伤明显。青紫颗粒可降低麦胶蛋白所致的过敏性紫癜小鼠血清AOPPs、CIC、BUN、Cr水平,降低麦胶蛋白所致过敏性紫癜小鼠皮肤补体C3、TGF-β1表达及肾脏IgA、补体C3、补体C4、TGF-β1表达,减轻肾脏病理损伤,减少皮肤及肾脏IgA1异常糖基化。结论:青紫颗粒可改善麦胶蛋白所致过敏性紫癜小鼠的肾脏损伤,该作用与其降低AOPPs水平,减少IgA、CIC沉积和IgA1异常糖基化,下调补体蛋白及TGF-β1表达有关。综上,青紫颗粒对过敏性紫癜动物模型肾脏损害具有保护作用,减少IgA、CIC沉积,降低AOPPs水平,下调补体蛋白及TGF-β1表达等可能是其主要作用环节。