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泰乐菌素是最常见的饲料添加剂成分之一,同时该药也作为畜禽疫病和蜜蜂美洲幼虫腐臭病的防治药物,无论作为饲料添加剂或是治病的药物,效果良好。所以该药研发不久,迅速在全球广泛应用,但其耐约菌株急速增加,欧盟首先禁止了泰乐菌素作为饲料添加剂,各国也相继制定了一系列的残留控制体系。在其残留检测方法中,免疫分析法因其敏感、特异、简单易操作,作为一种泰乐菌素残留的筛选方法,有独特优势。本研究在分析泰乐菌素免疫特性的基础上,运用单克隆抗体技术生产其单抗,并组装了快速检测试剂盒和试纸条。1、试验一把半抗原TL和载体蛋白BSA、OVA偶连制备了全抗原,并利用SDS-PAGE和紫外扫描做了相应的鉴定:用TL-BSA抗原免疫Balb/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与NS0瘤细胞用50%的PEG4000进行细胞融合,用HAT培养基筛选培养,以TL-OVA抗原检测杂交瘤细胞培养上清,获得了15株产生泰乐菌素抗体的杂交瘤细胞株。对强阳性克隆以有限稀释法连续克隆三次,建立1株分泌高亲和力抗TL单克隆抗体杂交瘤细胞株TL6E9,培养上清的ELISA效价分别为1:300。以TL6E9杂交瘤细胞,腹腔注射Balb/c小鼠诱生腹水,其ELISA效价为2.5x10-6,免疫球蛋白亚类为IgG2a。单抗与其他药品的交叉反应率非常低。3、试验二利用基于试验一制备的抗泰乐菌素的单克隆抗体,依据酶联免疫吸附实验和胶体金技术原理,分别组装了间接抑制ELISA检测试剂盒和免疫检测试纸条,并用于检测蜂蜜、牛奶、畜禽的饲料、组织或是代谢物中泰乐菌素的残留。试剂检测盒泰乐菌素残留可以在一个小时内完成;试纸条则可以在8到10分钟内完成。试剂盒和试纸条的最低检测限在10ng/mL,半量抑制浓度(IC50)在30ng/mL;试剂盒和试纸条可以广泛的用于对泰乐菌素残留的定性、半定量和定量检测。