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目的:探讨肠道超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN)中HCN2亚型在肠易激综合征(IBS)大鼠肠道高敏感及肠道动力异常中的作用,从而进一步揭示IBS发病机理,为IBS的治疗提供新的靶点。方法:(1)IBS模型大鼠自出生后第8d起,每天下午同一时间接受一次结直肠刺激(colorectal irritation,CI),持续一周;正常对照组大鼠除了不行结直肠刺激外,其他过程与IBS模型组一样。大鼠在出生后第8周,通过检测腹外斜肌对结直肠扩张的反应来评估大鼠是否出现内脏痛觉敏化;并通过腹部触诊与肉眼观察肛门口的清洁度,剔除便秘与明显腹泻的大鼠进入实验。(2)采用Western bolt方法检测HCN2在IBS模型鼠肠道的表达。(3)腹腔注射给予0.1ml浓度为5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L的HCN2阻断剂(尼氟酸),观察不同浓度的尼氟酸(Niflumic acid)对IBS模型组大鼠和正常对照组大鼠腹外斜肌放电的变化。(4)IBS模型大鼠鞘内给予药物ZD7288(HCN非选择性抑制剂)阻断HCN通道,30min后再腹腔注射50μmol/L尼氟酸,观察其对腹外斜肌放电的影响,以明确尼氟酸是通过HCN通道起作用。(5)观察大鼠玻璃小球排出时间和2h粪便颗粒数,以及腹腔注射HCN2抑制剂(尼氟酸)对上述观察指标的影响,以明确尼氟酸对IBS模型大鼠在体肠道运动功能的影响。(6)离体肠道运动记录,在灌流液中分别加入HCN2抑制剂(尼氟酸)和HCN通道非选择性抑制剂(氯化铯)后,观察其对肠道运动频率和幅度的影响。结果:(1)IBS模型大鼠内脏痛觉敏感性高于正常对照大鼠,差异存在统计学意义(p<0.05)。(2)Western blot结果显示HCN2在IBS模型大鼠结直肠和回肠的表达高于正常大鼠,有统计学意义(p<0.05)。(3)腹腔给予HCN2的抑制剂尼氟酸可显著抑制IBS模型组大鼠的痛觉敏感性(p<0.05),并且表现出明显的剂量依赖效应。(4)IBS模型组大鼠脊髓鞘内给予ZD7288阻断HCN通道后,再腹腔注射尼氟酸则对其痛觉敏感性无抑制作用。(5)给药前,IBS模型大鼠玻璃小球排出所需的时间较正常对照大鼠缩短(p<0.05)及2h排出的粪粒颗粒数较正常对照大鼠增加(p<0.01);腹腔注射尼氟酸后,与给药前比较,正常对照大鼠玻璃小球排出时间和2h排出的粪粒颗粒数无明显变化,而IBS模型大鼠玻璃小球排出所需时间延长(p<0.05)及排便颗粒数减少,差异有统计学意义(p<0.01)。(6)与正常大鼠比较,IBS模型大鼠离体肠道运动频率加快、运动幅度增大,有统计学意义(p<0.05);灌流液中分别加入尼氟酸和氯化铯后,正常对照组大鼠肠道运动频率、运动幅度没有明显变化,而IBS模型组大鼠肠道运动频率减慢、运动幅度减小,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:新生期接受结直肠扩张刺激的大鼠,可在大鼠成年后出现内脏痛觉敏化及肠道运动异常,尼氟酸可抑制IBS大鼠内脏痛觉敏化及肠道运动加快,其作用机制可能与阻断HCN2通道活性有关。