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不结球白菜(Brassica campestris ssp. chinensis Makino)属十字花科芸苔属,原产于中国,是大众最喜爱的蔬菜之一。近年来,不结球白菜的市场需求不断增长,而目前主要栽培品种较为单一,这就使得培育新品种成为当前育种紧要任务。不结球白菜花发育对繁殖后代具有重要影响,因此对不结球白菜的花发育相关研究对选育新品种具有重要意义。本文以不结球白菜重瓣花W051、对照W052和保持系W053为材料,研究其花中花特性与乙烯代谢的关系。要研究结果如下:1.不结球白菜重瓣花突变系、对照和保持系的生长生理特性分析对不同材料各5株进行生长指标的测量和拍照,观察初花期花序、花、花蕾的特性,并对初花期叶片和花蕾的叶绿素和丙二醛的含量进行测定。结果表明,重瓣花材料表现出两种类型:雄蕊瓣化和花中花。主花序花蕾数为:对照>保持系>突变系。保持系的花径、雄蕊长度和花瓣长度显著长于对照和突变系。突变系和对照的现蕾期和初花期比保持系晚7天。突变系主花序花数显著多于对照和保持系,雄蕊数和单花花瓣数不变。花中花突变体产生是由子房膨大,破裂出更多新的花蕾。花蕾的各种叶绿素都表现为:突变系>对照>保持系,叶片的各种叶绿素都表现为:保持系>突变系>对照。突变系花蕾的丙二醛含量显著高于对照和保持系,分别为对照和保持系的31.9倍和36.6倍;而叶片中突变系丙二醛的含量亦显著高于保持系,但突变系与对照之间差异不显著。这些结果表明突变系、对照和保持系在花蕾、花序生长性状上差异显著;突变系表现出早衰倾向,与从前我们对花器官乙烯响应途径的高度表达现象相吻合。2.乙烯响应因子在重瓣花突变体中表达采用气相色谱法检测突变系、对照和保持系三种不结球白菜各器官乙烯释放量;再测定各器官乙烯生物合成关键限制酶ACS和ACO活性;然后是用乙烯利及乙烯生物合成抑制剂外源喷施后,在24h内,实时荧光定量检测叶片的乙烯响应因子ERFB001、ACO1和ACS6基因表达;最后在开花期观察统计开花性状,并对不同喷施的花蕾的ERFB001、ACO1和ACS6基因进行定量表达。结果表明,突变体各器官中乙烯释放量、乙烯生物合成关键限制酶ACS和ACO活性显著高于对照和保持系。这些外源物质喷施后,不同材料的部分开花性状发生明显变异。花蕾中ERFB001与ACS6相对表达量类似,都表现出Ag+和Co2+溶液喷施的突变系显著增大,而其它数值很小。这说明突变体产生促进乙烯生物合成。在叶片中,银离子对ACC氧化酶基因的表达没有调控作用,钴离子先抑制后促进ACC氧化酶基因表达,银离子和钴离子均具有调控ACC合成酶基因表达的作用,银离子和钴离子对乙烯响应因子ERFB001表达都是具有抑制作用,且它们抑制作用相差不多。在叶片中,乙烯利抑制ACC氧化酶和ACC合成酶基因的表达,在对照体中乙烯利抑制乙烯响应因子ERFB001的表达,在保持系中高浓度外源乙烯抑制ERFB001基因表达,而低浓度外源乙烯促进ERFB001基因的表达。ACS6基因与乙烯响应因子ERFB001密切相关,可能是上下游基因。Ag+和Co2+能显著增加花蕾的ACC合成酶基因及乙烯响应因子ERFB001的表达。3.花发育相关基因在不结球白菜花蕾及花蕾突变部位的表达对不结球白菜的花蕾及花蕾突变体的各部位进行实时荧光定量检测A类AP2基因和C类AG基因表达,再对花蕾的花瓣和花柱两部分进行荧光定量检测乙烯响应因子ERFB001及乙烯生物合成途径关键限制酶基因的表达。结果表明,A类基因可能不参与突变体产生,C类基因可能在花中花突变体突变途径中扮演重要的作用。突变体乙烯响应因子ERFB001与雄性不育特性密切相关,而与花柱的突变关系不大。突变体发生突变后,乙烯生物合成增强了,反映出突变体的突变与乙烯响应机制密切相关。