【摘 要】
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目的本研究拟通过动物实验研究,从肝脏形态学变化、肝功能、肝脏纤维化程度和TGF-β1/Smads信号通路等方面探讨三仁汤对二甲基亚硝胺（DMN）诱导的肝纤维化（HF）大鼠的防治作用。方法6周龄Wistar雄性大鼠48只,随机数字法将大鼠分为空白组、模型组、三仁汤低、中、高剂量组(4.1 g·kg-1、8.2 g·kg-1、16.4 g·kg-1)和秋水仙碱组(1.0×10-4g·kg-1),每组8
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目的本研究拟通过动物实验研究,从肝脏形态学变化、肝功能、肝脏纤维化程度和TGF-β1/Smads信号通路等方面探讨三仁汤对二甲基亚硝胺（DMN）诱导的肝纤维化（HF）大鼠的防治作用。方法6周龄Wistar雄性大鼠48只,随机数字法将大鼠分为空白组、模型组、三仁汤低、中、高剂量组(4.1 g·kg-1、8.2 g·kg-1、16.4 g·kg-1)和秋水仙碱组(1.0×10-4g·kg-1),每组8只。每周前两天空白组按1.6 ml·kg-1腹腔注射生理盐水,其余组按1.6 ml·kg-1腹腔注射5%二甲基亚硝胺,共4周。自造模开始三仁汤各剂量组和秋水仙碱组按相应剂量予药物干预,空白组和模型组给予同体积灭菌饮用水,连续4周。通过HE、Masson染色观察各组大鼠肝脏病理情况,采用酶联免疫吸附法（ELISA）进行肝功能（ALT、AST、PDGF）与纤维化程度（HA、LN、TIMP-1、MMP-1）检测来评估各组大鼠肝脏功能,用PCR法测定TGF-β1、Smad3及Smad7的基因表达水平,用WB法测定Smad3及α-SMA蛋白表达水平。结果1.一般情况:肉眼观察发现模型组大鼠随着造模时间延长,大鼠出现毛发枯黄无光,饮食、活动减少,大便粘臭,小便色黄,至造模第三周,大鼠开始出现扎堆的表现,三仁汤各浓度组和秋水仙碱组大鼠以上情况较模型组有明显改善。2.肝脏形态学比较:通过光镜观察HE染色和Masson染色结果,发现模型组大鼠肝组织病变显著,三仁汤各浓度组和秋水仙碱组肝损伤较模型组减轻。3.血清肝功能和纤维化程度比较:与空白对照组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、PDGF、HA、LN、TIMP-1含量均升高（p＜0.01）,MMP-1含量降低（p＜0.01）。与模型组比较,秋水仙碱及三仁汤各组大鼠血清ALT、AST、HA、LN均降低（p＜0.01）;三仁汤低、中浓度组PDGF降低（p＜0.01）,而秋水仙碱组和高浓度组PDGF较模型组无统计学差异;三仁汤低、中浓度组大鼠血清MMP-1与模型组无统计学差异,高浓度组、秋水仙碱组则升高（p＜0.01）;三仁汤低浓度组TIMP较模型组降低（p＜0.05）,中、高浓度组和秋水仙碱组降低（p＜0.01）。4.TGF-β1、Smad3及Smad7 m RNA表达水平比较:模型组TGF-β1、Smad3、Smad7m RNA较空白对照组上调（p＜0.01）,三仁汤各浓度组和秋水仙碱组TGF-β1、Smad3较模型组下调（p＜0.01）,Smad7 m RNA较模型组上调（p＜0.01）。5.α-SMA、Smad3蛋白表达水平比较:模型组α-SMA、Smad3蛋白表达较空白对照组升高（p＜0.01）,三仁汤低浓度组α-SMA蛋白表达较模型组降低（p＜0.05）,三仁汤中、高浓度组和秋水仙碱组α-SMA蛋白表达较模型组降低（p＜0.01）,三仁汤各浓度组和秋水仙碱组Smad3蛋白表达较模型组降低（p＜0.01）。结论1.三仁汤能通过抑制TGF-β1/Smads信号通路,明显改善肝脏形态学结构、肝脏炎症,减轻肝脏纤维化程度,从而达到保护肝功能的作用。2.低、中浓度三仁汤改善HF大鼠肝脏炎症效果较好,中、高浓度三仁汤改善HF大鼠肝脏纤维化程度效果较好,中浓度三仁汤防治DMN诱导的HF大鼠防治效果最佳。
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